[发明专利]一种紫苏子抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种紫苏子抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和用途。

背景技术

人体在利用氧气进行代谢反应时，会在体内产生大量含氧自由基，体内的抗氧化系统便会受到不够用的危机，从而引起癌症、动脉硬化、糖尿病、老年痴呆等重大疾病。研究表明，通过补充抗氧化物质能够消除体内过多的含氧自由基，对自由基引起的相关疾病可得到有效预防，通过食用功能性的抗氧化食品也是一种极为有效的补充抗氧化剂的方法。

紫苏子为唇形科植物紫苏的干燥成熟果实Perilla frutescens(L.)Britt.，收载于《中华人民共和国药典》2010版一部，具有降气化痰、止咳平喘、润肠通便的功效。现代药理学研究表明，紫苏子主要含有脂肪油、生物碱类、糖类、黄酮类等成分，具有降血脂、止咳平喘、抗过敏、抗衰老、抗氧化等作用。在质量控制方面，《中华人民共和国药典》2010版一部仅收载了紫苏子对照药材的鉴别和迷迭香酸的含量测定。由于中药的成分复杂，有效成分又多随产地、来源、采收季节等情况变化而变化，因此，采用指纹图谱技术全面反映药材的整体特征，并进一步与其活性相关联，对于完善目前的质量控制方法，保证临床用药的安全有效是十分必要的。目前，关于紫苏子的指纹图谱研究尚未有文献报道，更没有建立紫苏子抗氧化提取物的指纹图谱，从质量控制方面，有关紫苏子抗氧化提取物的标准指纹图谱亦没有报道。

发明内容

本发明是要提供一种紫苏子抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和用途。

本发明一种紫苏子抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法，是按以下步骤进行：一、供试品溶液的制备：a、取紫苏子药材，粉碎后加入沸程为60～90℃的10倍质量的石油醚，回流3次，每次2h，得到残渣；

b、将残渣室温干燥后，加入10倍质量的质量浓度为75%的乙醇，回流2次，每次2h,收集两次回流所得溶液，然后过滤，收集滤液，再将滤液减压浓缩至干，得浸膏，即紫苏子抗氧化活性提取物；

c、将步骤b得到的紫苏子抗氧化活性提取物，用甲醇溶解成浓度为1mg/mL的溶液，用微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液；

二、指纹图谱的制作：将步骤一得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪，以乙腈为A相，质量百分含量为0.5%的乙酸水溶液为B相进行梯度洗脱；

其中，高效液相色谱条件为：

色谱柱填料Thermo C18，规格为250×4.6mm，5μm；柱温为35℃；流动相为A相乙腈和B相质量百分含量为0.5％乙酸水溶液，流速0.8mL/min，检测波长280nm，进样10μL；

在此条件下分析供试品溶液，得到紫苏子抗氧化活性提取物的指纹图谱。

本发明采用一种紫苏子抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法得到的紫苏子抗氧化活性提取物标准指纹图谱。

本发明紫苏子抗氧化活性提取物标准指纹图谱的用途是指紫苏子抗氧化活性提取物指纹图谱作为标准指纹图谱用于紫苏子质量控制中。

本发明提取了紫苏子中具有抗氧化作用的提取物，通过对DPPH自由基清除试验，证明了该提取物具有优良的抗氧化活性，本发明紫苏子抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法具有快速准确、重现性好、操作性强、稳定可靠等优点。本发明的紫苏子抗氧化活性提取物标准指纹图谱有9个共有特征峰，这些共有特征峰构成了紫苏子抗氧化活性提取物的指纹特征，可作为紫苏子抗氧化活性提取物的标准指纹图谱。本发明的紫苏子抗氧化活性提取物标准指纹图谱作为标准指纹图谱经多批样品验证后可用于紫苏子质量控制中，用于从整体上评价和控制紫苏子药材的质量,避免了只对单一或几个成分进行研究，使分析结果更加全面科学。

附图说明

图1为试验1提供的紫苏子抗氧化活性提取物标准指纹图谱；其中1至9为紫苏子抗氧化活性提取物的9个共有特征峰；

图2为S1-S10的10批紫苏子药材指纹图谱。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式一种紫苏子抗氧化活性提取物的高效液相色谱指纹图谱的建立方法，是按以下步骤进行：一、供试品溶液的制备：a、取紫苏子药材，粉碎后加入沸程为60～90℃的10倍质量的石油醚，回流3次，每次2h，得到残渣；

b、将残渣室温干燥后，加入10倍质量的质量浓度为75%的乙醇，回流2次，每次2h,收集两次回流所得溶液，然后过滤，收集滤液，再将滤液减压浓缩至干，得浸膏，即紫苏子抗氧化活性提取物；