[发明专利]一种快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法无效
| 申请号： | 201310351330.0 | 申请日： | 2013-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN103525908A | 公开（公告）日： | 2014-01-22 |
| 发明（设计）人： | 黄明;程欣;杨静;黄继超;周兴虎 | 申请（专利权）人： | 南京吉泰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 211225 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 血旺中鸡鸭 猪血 成分 方法 | ||
1.一种快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法，其特征在于：以血旺为材料，提取DNA，使用TaqMan探针和特异性引物，进行荧光定量PCR反应；应用ABI 7500 Software SDS1.4对实验结果进行分析处理，以Ct值小于36的扩增作为检测的阳性结果；其中，TaqMan探针和特异性引物具体如下：
正向引物1：5’-GGAGCACCTCTATCAGAGAAAGACA-3’，
反向引物1：5’-GTGTGTAGAGCTCAAGATCAATCCC-3’，
TaqMan探针1：FAM-TGGGAACAAGCATGAATGTAAGTGGATGGT-BHQ1；
正向引物2：5’-CGAGAGGCTGCCGTAAAGG-3’，
反向引物2：5’-TGCAAGGAACACGGCTAAGTG-3’，
TaqMan探针2：CY5-ACAGTAGGTCTGACGTGACTCCCCGA-BHQ1；
正向引物3：5’-CAGCTGGCCTGCCGG-3’，
反向引物3：5’-CCCAGTGGAATGTGGTATTCA-3’，
TaqMan探针3：HEX-CTGCCAAGCTCTGCCACTCCTCTG-BHQ1。
2.根据权利要求1所述的快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法，其特征在于：所述荧光定量PCR反应，50μL的反应体系组成为：Premix Ex Taq 酶25μL，6个特异性引物各1μL，3个TaqMan探针各2μL，Rox Reference Dye Ⅱ 染液1μL，DNA模板5μL， 剩余为ddH2O。
3.根据权利要求1所述的快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法，其特征在于：所述荧光定量PCR反应，条件为：95℃ 30s；95℃ 5s，60℃ 34s，40个循环。
4.根据权利要求1所述的快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法，其特征在于：该方法的DNA模板检测下限为0.15ng，浓度为0.03ng/μL。
5.根据权利要求1所述的快速检测血旺中鸡鸭猪血液成分的方法，其特征在于：该方法的灵敏度达1%。
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