[发明专利]水稻转录因子Os06g06970基因CDS序列的应用有效
申请号: | 201310351478.4 | 申请日: | 2013-08-13 |
公开(公告)号: | CN104371022B | 公开(公告)日: | 2017-06-20 |
发明(设计)人: | 刘军;刘斌;赵涛;李宏宇;林辰涛 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/82;C12N1/21;C12N15/11;A01H5/00 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻 转录 因子 os06g06970 基因 cds 序列 应用 | ||
技术领域
本发明涉及基因工程领域,具体地说,涉及水稻转录因子Os06g06970基因CDS序列的应用。
背景技术
水稻(Oryza sativa L.)是我国和全世界最重要的三大粮食作物之一,是世界一半以上人口的主食,也是一个重要的功能基因研究的模式植物。与其相关的遗传学和分子生物学研究一直倍受研究者的重视,转录水平的调控是基因表达调控的重要方式。当前水稻增产的研究较依赖于有限的水稻种质资源,传统的杂交育种优势正在逐渐减弱,而水稻转基因技术有可能发掘水稻进一步增产的潜力。
在植物界中,能形成种子的植物约占植物总数的三分之二以上,作为重要的繁殖器官,种子同时也为人们提供食物来源,水稻就是其中的重要代表,种子来源于受精后的胚珠。从分子生物学的角度来说,种子的发育和萌发是一个有次序的、选择性的基因表达过程。而转录因子在基因表达的精确调控中起到了关键性的作用。
近些年,有关籽粒大小性状的分子遗传调控机制研究,已取得了一定进展,例如研究人员利用QTL定位了一些籽粒大小相关基因,其中GS3编码一个膜蛋白,是籽粒大小和器官大小的负调控因子;张启发(Yibo Li,Chuchuan Fan,QIfa Zhang.et al.(2011)Natural variation in GS5plays an important role in regulating grain size and yield in rice.Nature Gennetics)等研究发现GS5编码一个调节籽粒大小的丝氨酸羧肽酶,是控制籽粒大小的正调节因子,过表达GS5可使水稻籽粒明显变大;转录因子在调控籽粒大小方面起着非常重要的作用,OsWRKY78可以调节水稻茎的伸长和种子的发育,OsWRKY78突变体可使茎杆变矮化影响籽粒发育;螺旋-环-螺旋蛋白(bHLH)类转录因子能通过调控外稃和内稃细胞的长度影响谷粒的大小;PGL1碱性螺旋-环-螺旋蛋白(bHLH)异源二聚体作为结合DNA的bHLH的抑制子过表达后可增加籽粒长度和重量。
AP2/EREBP转录因子在花发育和逆境胁迫应答过程中起重要作用。根据该家族基因所含的AP2/EREBP结构域的数目不同可将其分为两类,AP2和EREBP亚家族。AP2亚家族含有两个正向重复的AP2结构域,EREBP亚家族含有单个AP2结构域。AP2亚类基因在花器官中表达,参花分生特性建立、花器官特性特化、花同源异型基因活性时空调节等花发育过程。EREBP亚类基因成员参与调节植物对生物和非生物因素的胁迫应答过程。许多外界条件,如乙烯、盐、伤害、低温、干旱等条件能诱导EREBP亚类家族基因的产生,使植物抗性,耐性提高。目前水稻中该家族基因只有属于EREBP亚类的OsEBP-89的报道。除了OsEBP-89之外,水稻中还存在相当数量的该家族基因。
发明内容
本发明的目的是提供水稻转录因子Os06g06970基因CDS序列的应用。
为了实现本发明目的,本发明首先提供一种组成型水稻转录因子,即融合蛋白(VP16)4-Linker-Os06g06970。
其中,VP16为来自单纯疱疹病毒的VP16蛋白,将4个VP16功能域基序融合在一起可构成一类增强子,增强转录因子的功能,从而在转基因植株中出现更明显的表型变化。上述融合蛋白中涉及的(VP16)4,即VP64是由4个VP16蛋白的氨基酸序列以Gly-Ser为间隔形成的融合蛋白,其氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ ID No.10和SEQ ID No.4所示。
上述融合蛋白中涉及的Linker由39个柔性氨基酸串联而成,其氨基酸序列如SEQ ID No.9所示,编码该Linker的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
上述融合蛋白中涉及的Os06g06970为水稻转录因子Os06g06970,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示,或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列;水稻转录因子Os06g06970基因的CDS序列为:SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
本发明还提供编码所述组成型水稻转录因子的基因,以及在严格条件下,可与该基因的核苷酸序列发生杂交的核苷酸序列。
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