[发明专利]一种利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法有效
申请号: | 201310357573.5 | 申请日: | 2013-08-15 |
公开(公告)号: | CN103509833A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
发明(设计)人: | 王敏;申雁冰;翟莹;郑宇 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12P13/02 | 分类号: | C12P13/02;C12R1/01 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 赵瑶瑶 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 赤红 球菌 制备 二氟苯 甲酰胺 方法 | ||
1.一种利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:方法如下
⑴转化:在pH6-9的KH2PO4-NaOH缓冲液体系中,投入底物2,6-二氟苯甲腈,赤红球菌(Rhodococcusruber)CGMCC3090细胞浓度0.66-3.30g/L,转化条件为转速110-220r/min,转化温度为20-40℃,转化时间3-28h;
⑵制备产物成品:将转化结束后的料液过滤,得到产物晶体,水洗产物晶体再经重结晶即可得到产物纯品。
2.根据权利要求1所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:在步骤⑴还加入终浓度为0.5wt%-10wt%的促溶剂。
3.根据权利要求2所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:所述促溶剂包括甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇、二甲基亚砜、丙酮或吐温80。
4.根据权利要求1所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:所述2,6-二氟苯甲腈的投入浓度为:0.5-3.5mol/L。
5.根据权利要求1所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:所述萃取处理的萃取溶剂为乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷或乙酸丁酯。
6.根据权利要求1所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:所述重结晶溶剂为甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷或正己烷。
7.根据权利要求1所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:所述赤红球菌CGMCC3090的发酵方法为:
⑴种子与发酵培养:取赤红球菌CGMCC3090菌种接种于一级种子培养基中,140-220r/min、26-32℃、培养24-32h,得到种子培养液,以2%-5%的接种量转接于新鲜的发酵培养基,培养42-54h,得到菌体发酵液;
⑵赤红球菌悬浮液的制备:将上述发酵液离心,去上清,所得湿菌体细胞用pH6-9的KH2PO4-NaOH缓冲液洗涤2-3次并悬浮于等体积的缓冲液中,得到赤红球菌细胞悬浮液。
8.根据权利要求1所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法,其特征在于:步骤⑵过滤得滤液,滤液经过萃取获得产物晶体,然后重结晶即得2,6-二氟苯甲酰胺纯品。
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