[发明专利]一种从大叶钩藤中提取柯诺辛碱的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种从大叶钩藤中提取柯诺辛碱的方法。

背景技术

柯诺辛碱为吲哚类生物碱，CAS登录号6877-32-3，分子式C22H28N2O4，分子量为384.46，分子结构式：

大叶钩藤为茜草科植物，味苦、徽涩，性凉，清火解毒，消肿止痛，祛风，通气血，具有降血压作用

通过文献检索，柯诺辛碱制备方法多采用有机试剂提取和硅胶柱分离。此类方法操作繁琐，制备量小，很难实现工业化生产。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种操作简单的从大叶钩藤中提取柯诺辛碱的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种从大叶钩藤中提取柯诺辛碱的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）取大叶钩藤粉碎，加5-10倍量5%盐酸水溶液浸泡提取2-3次，提取液加入超滤膜超滤，透过液再用纳滤膜浓缩，浓缩液加入阳离子大孔树脂吸附，氨水溶液洗脱，洗脱液减压浓缩，浓缩液加入氯仿萃取，回收氯仿，得粗提物；

2）上述粗提取物用75%甲醇溶液溶解，加入氯仿溶液充分混合，收集氯仿层浓缩，浓缩液加入适量石油醚结晶，结晶物再用丙酮溶液重结晶，干燥即得。

所述步骤1）超滤膜为截留分子量3000-10000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量200-300的中纤维素纳滤膜。

所述步骤1）中的氨水溶液洗脱为：6-10倍柱体积5%-15%的氨水溶液洗脱。

采用上述技术方案生产柯诺辛碱，，方法操作简单，所得产品纯度高，生产过长的酸水，可以循环利用，减少了污染，而且易于实现工业化。

具体实施方式

   下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1：

取干燥的大叶钩藤10kg，粉碎，加5倍量5%盐酸水溶液浸泡提取3次，提取液加入截留分子量3000的中空纤维素膜超滤，透过液再用截留分子量200的中纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液加入732阳离子大孔树脂吸附，水洗中性，用10倍柱体积10%的氨水溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至密度1.05，浓缩液加入氯仿萃取3次，回收氯仿，所得粗提物用75%甲醇溶液回流溶解，加1/2体积的氯仿溶液充分混合，收集氯仿层浓缩，浓缩液至1/5体积加入适量石油醚结晶，结晶物滤出，用10倍量90%丙酮溶液重结晶，干燥得柯诺辛碱13g，经HPLC检测，含量98.2%。

 实施例2：

 取干燥的大叶钩藤10kg，粉碎，加5倍量5%盐酸水溶液浸泡提取3次，提取液加入截留分子量6000的中空纤维素膜超滤，透过液再用截留分子量300的中纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液加入732阳离子大孔树脂吸附，水洗中性，用6倍柱体积15%的氨水溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至密度1.02，浓缩液加入氯仿萃取2次，回收氯仿，所得粗提物用75%甲醇溶液回流溶解，加入1/3氯仿溶液充分混合，收集氯仿层浓缩，浓缩液至1/6体积加入适量石油醚结晶，结晶物滤出，用8倍量80%丙酮溶液重结晶，干燥得柯诺辛碱11g，经HPLC检测，含量97.3%。

 实施例3：

取干燥的大叶钩藤10kg，粉碎，加5倍量5%盐酸水溶液浸泡提取3次，提取液加入截留分子量3000的中空纤维素膜超滤，透过液再用截留分子量200的中纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液加入732阳离子大孔树脂吸附，水洗中性，用7倍柱体积10%的氨水溶液洗脱，洗脱液减压浓缩至密度1.03，浓缩液加入氯仿萃取3次，回收氯仿，所得粗提物用75%甲醇溶液回流溶解，加入1/2氯仿溶液充分混合，收集氯仿层浓缩，浓缩液至1/8体积加入适量石油醚结晶，结晶物滤出，用8倍量90%丙酮溶液重结晶，干燥得柯诺辛碱13.2g，经HPLC检测，含量97.1%。