[发明专利]miRNA‑27b在抗肿瘤耐药中的应用

权利要求书

1.一种活性成分的用途，其中，所述的活性成分选自下组：

(a).miRNA-27b家族的微小RNA，所述miRNA-27b家族的微小RNA包括：miRNA-27b或经修饰的miRNA-27b衍生物；

(b).前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的miRNA-27b；

(c).多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA，并加工形成(a)中所述的微小RNA；

(d).表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的miRNA-27b、或(b)中所述的前体miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；

其特征在于，所述活性成分用于制备增强肿瘤细胞对药物敏感性的药物组合物、或制备预防或治疗耐药性肿瘤的药物组合物，且所述的肿瘤为p53野生型或CYP1B1高表达的肿瘤；

其中，(a)中所述经修饰的miRNA衍生物是式I所示结构的化合物单体或其多聚体：

(X)n-(Y)m

式I，

在式I中，

各X为(a)中所述的微小RNA；

各Y独立地为促进微小RNA施药稳定性的修饰物；

Y连接于X的左侧、右侧或中间；

n为1-100的正整数；

m为1-1000的正整数；

各“-”表示接头。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的miRNA-27b的序列如SEQ ID NO.:1所示。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物还包括任选的抗肿瘤药物。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的n为1-20的正整数，m为1-200的正整数；和/或

所述的接头为化学键。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的n为1、2、3、4或5；和/或

所述的接头为共价键。

6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(b)所述的前体miRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.:2所示。

7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(c)中所述的多核苷酸具有式II所示的结构：

Seq_正向-X-Seq_反向

式II，

式II中，

Seq_正向为能在宿主中被加工成所述的微小RNA核苷酸序列；

Seq_反向为与Seq_正向基本上互补或完全互补的核苷酸序列；

X为位于Seq_正向和Seq_反向之间的间隔序列，并且所述间隔序列与Seq_正向和Seq_反向不互补；

并且式II所示的结构在转入宿主细胞后，形成式III所示的二级结构：

式III中，Seq_正向、Seq_反向和X的定义如上述，

||表示在Seq_正向和Seq_反向之间形成的碱基互补配对关系。

8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(d)中所述的表达载体包括：病毒载体或非病毒载体。

9.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的肿瘤选自下组：肺癌、肝癌、肾癌、胃癌、肠癌、子宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、头颈癌。

10.一种筛选用于提高肿瘤细胞对药物敏感性的候选药物的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)将候选物质施用于测试组的细胞或动物，并测定施用后所述测试组中miRNA-27b的表达水平；

(b)将测试组的miRNA-27b与对照组的miRNA-27b的表达水平进行比较，所述对照组中未施用所述候选物质；

其中，当测试组的miRNA-27b的表达水平显著高于对照组的miRNA-27b的表达水平时，则表明该候选物质是用于提高肿瘤细胞对药物敏感性的候选药物，其中肿瘤细胞为p53野生型或CYP1B1高表达的肿瘤细胞。