[发明专利]顺式环氧琥珀酸水解酶的编码基因、其编码的多肽及其相关应用有效
申请号: | 201310369774.7 | 申请日: | 2013-08-22 |
公开(公告)号: | CN103614398A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 张建国;谢志鹏;程永青;潘海峰;鲍文娜 | 申请(专利权)人: | 杭州宝晶生物化工有限公司 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N9/14;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12P7/46 |
代理公司: | 北京中原华和知识产权代理有限责任公司 11019 | 代理人: | 寿宁;张华辉 |
地址: | 311106*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 顺式 琥珀酸 水解 编码 基因 多肽 及其 相关 应用 | ||
1.一种顺式环氧琥珀酸水解酶的编码基因,其特征在于:所述编码基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的顺式环氧琥珀酸水解酶的编码基因,其特征在于:所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.一种顺式环氧琥珀酸水解酶的编码基因,其特征在于其与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列具有70%以上的同源性。
4.根据权利要求3所述的顺式环氧琥珀酸水解酶的编码基因,其特征在于其与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列具有80%以上的同源性。
5.根据权利要求4所述的顺式环氧琥珀酸水解酶的编码基因,其特征在于其与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列具有90%以上的同源性。
6.根据权利要求3所述的顺式环氧琥珀酸水解酶的编码基因,其特征在于:所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:19所示。
7.一种多肽,其特征在于其具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
8.一种由权利要求2所述的编码基因编码的多肽,其特征在于所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
9.一种多肽,其特征在于其氨基酸序列是由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列经过氨基酸的取代、缺失或添加而得,并且具有顺式环氧琥珀酸水解酶活性。
10.根据权利要求9所述的多肽,其特征在于其具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的50个以上的氨基酸,其顺式环氧琥珀酸水解酶活力至少为完整氨基酸序列SEQ ID NO:2的80%以上。
11.根据权利要求10所述的多肽,其特征在于其具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的100个以上的氨基酸。
12.根据权利要求10所述的多肽,其特征在于其顺式环氧琥珀酸水解酶活力至少为完整氨基酸序列SEQ ID NO:2的95%以上。
13.根据权利要求9所述的多肽,其特征在于其氨基酸序列如SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:17或SEQ ID NO:20所示。
14.一种多核苷酸,其特征在于其具有用于编码权利要求9所述多肽的核苷酸序列。
15.根据权利要求14所述的多核苷酸,其特征在于其与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列具有70%以上的同源性。
16.一种重组表达载体或重组微生物菌株,其特征在于:用于表达权利要求7-13任一权利要求所述的多肽。
17.一种使用权利要求7-13任一权利要求所述的多肽制备L(+)-酒石酸或其盐的方法,其特征在于:将该多肽与顺式环氧琥珀酸或其盐反应。
18.根据权利要求17所述的制备L(+)-酒石酸或其盐的方法,其特征在于:顺式环氧琥珀酸或其盐的摩尔浓度为0.1~2mol/L,pH值为4.5~11.0,反应温度为10~55℃。
19.根据权利要求18所述的制备L(+)-酒石酸或其盐的方法,其特征在于:顺式环氧琥珀酸或其盐的摩尔浓度为0.5~1.5mol/L,pH值为6.0~9.5,反应温度为20~45℃。
20.根据权利要求19所述的制备L(+)-酒石酸或其盐的方法,其特征在于:顺式环氧琥珀酸或其盐的摩尔浓度为0.8~1.2mol/L,pH值为8.0~9.0,反应温度为32~40℃。
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