[发明专利]人PGI抗原表位肽、抗原、抗体、用途及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于多肽化学和免疫学领域，具体涉及人胃蛋白酶原I（PGI）抗原表位肽、用该抗原表位肽制备的PGI特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体、所述抗体在制备人PGI体外诊断试剂盒上的用途、人PGI体外诊断试剂盒，以及一种用于定量检测待测物中人PGI蛋白的荧光免疫层析试纸及其制备方法。

背景技术

胃蛋白酶原（PG）是胃液中胃蛋白酶的无活性前体。人胃蛋白酶原按其电泳迁移率由快至慢，可分为PG1至PG7七种同工酶原，并且根据其生化性质、免疫原性、细胞来源以及组织内分布可分为PGI和PGII两个亚群。七种同工酶原中的PG1至PG5免疫原性近似，称为胃蛋白酶原I（PGI），其主要由胃腺的主细胞和黏液颈细胞分泌；PG6至PG7被称为胃蛋白酶原II（PGII），除了由胃体和胃底黏膜的泌酸腺的主细胞分泌外，泌酸腺的黏液颈细胞、贲门腺和胃窦的幽门腺的黏液细胞以及十二指肠上段的Brunner腺也能产生PGII。胃几乎是PG的唯一来源，并且在分泌阶段的分泌量会发生变化。血清PGI和PGII反映了胃粘膜不同部位的分泌功能。合成后的PG大部分进入胃腔，在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶，只有少量PG（约1%）透过胃黏膜毛。因此，血清PG浓度可以反映其分泌水平。正常人血清中的PGI是PGII的6倍，当胃黏膜发生病理变化时，血清PG含量也随之发生改变。

血清PG含量与幽门螺杆菌（HP）感染、慢性胃炎、胃癌等相关。在不同胃部疾病中，血清PGI、PGII和PGI/PGII的值发生相应变化，其升高、降低还是不变并不一致，作为诊断或治疗结果指标的灵敏度和特异度也各不相同。因此，对于不同胃部疾病，血清PGI、PGII和PGI/PGII的值也有不同的判断标准。

PGI是检测胃泌酸腺（胃底腺）细胞功能的指针，胃酸分泌增多，则PGI升高；胃酸分泌减少或胃粘膜腺体萎缩，则PGI降低。例如，在胃酸分泌过多的浅表性胃炎和幽门螺杆菌（HP）感染的胃炎中，PGI的分泌会增加；而在慢性严重萎缩性胃炎中，当主细胞减少时PGI含量下降。高浓度的PGI还作为十二指肠溃疡及并发症危险性的亚临床指征，并且还可以作为观察HP（幽门螺旋杆菌）感染根除治疗疗效的一个指标。

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其病死率居各种恶性肿瘤之首，其早期诊断、早期治疗成为提高患者生存质量、降低病死率的唯一途径。国内外学者对胃癌患者血清PG变化作了大量的研究发现：当患胃癌时，血清PGI水平降低，PGII水平基本保持正常或升高，进而，测定血清PGI的水平和PGI/PGII的比值有助于胃癌的鉴别诊断，过低的PGI和PGI/PGII应警惕早期胃癌。由于血清PG的含量直接反映胃黏膜的功能，因此胃癌患者血清PGI水平明显下降，表明胃癌患者胃黏膜分泌能力下降。80％以上的胃癌伴有萎缩性胃炎，而萎缩性胃炎可导致胃黏膜主细胞丢失，从而影响其分泌功能；胃癌患者血清PGI水平明显下降与胃癌患者胃黏膜萎缩、肠化从而分泌降低有关。因此血清PGI及PGI/PGII明显下降对监测早期胃癌具有重要的临床意义，可有效应用于胃癌高发区人群的初步筛查。PG检测作为非侵入性方法，可降低胃病患者或胃癌高危人群检查的痛苦，并且简便、经济，具有重大意义。

检测血清中的PGI水平的最理想的方法是免疫测定。因此，寻找合适的具有免疫原性的PGI抗原表位肽、制备特异性的PGI抗原及抗体即成为了重点。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种人PGI抗原表位肽，用该抗原表位肽制备的PGI特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体，其在制备人PGI体外诊断试剂盒上的用途，以及人PGI体外诊断试剂盒。

具体而言，本发明提供了：

一种人PGI抗原表位肽，其中所述PGI抗原表位肽的氨基酸序列为如下两者之一：

(1)Tyr-Lys-Val-Pro-Leu-Ile-Arg-Lys-Lys-Ser-Leu-Arg-Arg；

(2)Tyr-Lys-Asn-Phe-Thr-Val-Phe-Asp-Arg-Ala-Asn-Asn-Gln。

本发明还提供了一种PGI抗原，其是通过使所述的人PGI抗原表位肽(1)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了一种PGI抗原，其是通过使所述的人PGI抗原表位肽(2)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了一种人PGI抗体，其是由所述的PGI抗原制备而成的单克隆抗体或多克隆抗体，其中所述PGI抗原是通过使所述的人PGI抗原表位肽(1)与载体蛋白偶联制备而成的。