[发明专利]水稻侧根发生控制基因OsHK1及编码的蛋白质有效
申请号: | 201310372601.0 | 申请日: | 2013-08-23 |
公开(公告)号: | CN103484472A | 公开(公告)日: | 2014-01-01 |
发明(设计)人: | 丁沃娜;朱世华;林丽 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415 |
代理公司: | 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 | 代理人: | 程晓明 |
地址: | 315211 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻 侧根 发生 控制 基因 oshk1 编码 蛋白质 | ||
技术领域
本发明涉及水稻侧根发生控制基因,具体涉及水稻侧根发生控制基因OsHK1及编码
的蛋白质。
背景技术
植物根系主要可分为直根系和须根系,水稻根系构型为须根系。须根系植物的根系由种子根、不定根和侧根组成,由于庞大的侧根,极大的增加了水稻从外界吸收水分和矿物质的能力。在高等植物中,侧根起始于主根上特定的细胞层-中柱鞘,根据其所背邻的维管组织,可将其分为两种细胞类型:在双子叶植物拟南芥中,侧根起始于临近木质部的中柱鞘细胞;在如水稻、玉米谷类作物中,侧根起始于临近原生韧皮部的中柱鞘细胞。水稻侧根的发育过程与拟南芥比较相似,首先两个临近的中柱鞘细胞进行垂周分裂,继而进行多次的垂周、平周分裂,原基逐渐膨大,并逐步穿过皮层,到最终突破表皮。水稻侧根的发育增强,对水稻生长及高产具有重要意义。如授权公告号为CN102268081的发明专利,就公开了水稻侧根控制基因OsIAA11及编码的蛋白质,该水稻侧根控制基因OsIAA11是从Osiaa11突变体中克隆的基因,具有控制水稻侧根发育的功能,可培育出侧根控制功能较好的转基因水稻。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种水稻侧根发生控制基因OsHK1及编码的蛋白
质,该控制基因OsHK1及编码的蛋白质可以使水稻对细胞分裂素不敏感,从而选育出控制侧根发生和生长的转基因水稻。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:水稻侧根发生控制基因OsHK1,该控制基因OsHK1全长为5964bp(OsHK1基因号:LOC_Os02g50480),其中CDS长为2994bp,CDS的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。若CDS核苷酸序列中在466bp处添加了如SEQ ID NO:3所示的44bp序列,成为突变体Oshk1-1水稻。或者CDS核苷酸序列中在2923bp处的胞嘧啶(C)突变为胸腺嘧啶(T),成为突变体Oshk1-2水稻。
本发明的基因改进:核苷酸序列还包括在SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列中其它的添加、取代、插入和缺失一个或多个核苷酸生成的突变体、等位基因和衍生物。
水稻侧根发生控制基因OsHK1编码的蛋白质,该蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,当控制基因OsHK1的CDS核苷酸序列中在466bp处增加了如SEQ ID NO:3所示的44bp序列时,造成翻译提前终止,编码产物只有如SEQ ID NO:4所示的176个氨基酸,突变的氨基酸位置位于CHASE结构域。当CDS核苷酸序列中在2923bp处的胞嘧啶突变为胸腺嘧啶时,氨基酸序列中975位的脯氨酸替换成了丝氨酸,该位点位于接收域。
本发明的蛋白质改进:氨基酸序列还包括在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列中其它的添加、取代、插入和缺失一个或多个氨基酸生产的衍生物。
与现有技术相比,本发明的优点在于水稻侧根发生控制基因OsHK1及编码的蛋白质,控制基因OsHK1全长为5964bp,其中CDS长为2994bp, CDS的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,该控制基因OsHK1中CDS的添加、取代、插入和缺失一个或多个核苷酸生成的突变体,其编码的蛋白质表现为使水稻对细胞分裂素不敏感,而细胞分裂素抑制水稻侧根的发生但促进已生成的侧根的伸长,导致突变体侧根能正常发生,极大的增加了水稻从外界吸收水分和矿物质的能力。通过利用该基因对水稻品种进行转基因改造,因此本发明提供了水稻侧根发育的分子调控机制,并为通过基因工程手段调控水稻根系结构提供了基础。
附图说明
图1为水稻细胞分裂素不敏感突变体Oshk1-1和野生型秀水63在正常条件和0.2μM 6-BA处理7天后的全株照(A)和根部照(B);
图2为基因和编码的蛋白质的结构图和突变位点,图2中,A是基因结构和突变位点(箭头所指);B是蛋白质结构和突变方式(箭头所指),数字代表对应功能域的氨基酸位点;
图3为功能互补实验T1代转基因水稻的表型(A)和两个回复株系(OV1和OV2)的RT-PCR检测图(B);
图4为转基因回复载体pCAMBIA-1300的结构示意图。
具体实施方式
以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1
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