[发明专利]水稻转录因子Os05g09480基因的应用有效
申请号: | 201310372909.5 | 申请日: | 2013-08-23 |
公开(公告)号: | CN103408670A | 公开(公告)日: | 2013-11-27 |
发明(设计)人: | 赵涛;刘斌;李宏宇;刘军;林辰涛 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/82;C12N1/21;A01H5/00;A01H5/10;C12N15/11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻 转录 因子 os05g09480 基因 应用 | ||
技术领域
本发明涉及基因工程领域,具体地说,涉及水稻转录因子Os05g09480基因的应用。
背景技术
水稻(Oryza sativa L.)是我国和全世界最重要的三大粮食作物之一,是世界一半以上人口的主食,也是一个重要的功能基因研究的模式植物。与其相关的遗传学和分子生物学研究一直倍受研究者的重视,转录水平的调控是基因表达调控的重要方式。当前水稻增产的研究较依赖于有限的水稻种质资源,传统的杂交育种优势正在逐渐减弱,而水稻转基因技术有可能发掘水稻进一步增产的潜力。
在植物界中,能形成种子的植物约占植物总数的三分之二以上,作为重要的繁殖器官,种子同时也为人们提供食物来源,水稻就是其中的重要代表,种子来源于受精后的胚珠。从分子生物学的角度来说,种子的发育和萌发是一个有次序的、选择性的基因表达过程。而转录因子在基因表达的精确调控中起到了关键性的作用。
水稻转录因子Os05g09480属于Aux/IAA家族,Aux/IAA基因家族是对生长素诱导做出早期响应的3类基因家族之一。生长素诱导会使Aux/IAA基因的表达量瞬时升高.进而对生长素信号网络中其他基因的表达进行调控(正调控/负调控)。Aux/IAA基因家族是生长素信号转导通路的重要调节因子。Aux/IAA蛋白具有4个保守结构域.结构域Ⅰ具有转录抑制功能。结构域Ⅱ对Aux/IAA蛋白的稳定性起作用.结构域Ⅲ和Ⅳ负责蛋白的二聚化。Aux/IAA蛋白和转录因子ARF(auxin response factor)家族能形成杂合二聚体。在生长素作用下,Aux/IAA蛋白被降解,从而调动生长素信号途径下游基因的表达(Dharmosiri N,Estelle M.(2004)Auxin signaling and regulated protein degradation)。生长素在植物的生长发育过程中起着重要作用.Aux/IAA基因又是生长素信号传导途径中的重要调控基因。
Aux/IAA家族中的基因OsIAA23介导的生长素信号对于水稻静止中心细胞的胚后维持起到重要作用。一个根冠、侧根和冠根等根组织发育存在缺陷的水稻半显性突变体osiaa23,在胚后发育中丧失了根尖静止中心的特征建立,侧根与冠根数目减少且发育不良,生长迟缓,育性差,结实率降低,根对重力反应消失。突变体萌发后5天苗根尖缺失,静止中心处的细胞排列异常,根的分生组织细胞模式异常,根的横切面细胞分裂异常。其缺陷表型是由于OsIAA23蛋白的第二结构域的稳定突变造成。OsIAA23特异地在水稻主根、侧根和冠根的根尖QC处表达。与此一致,DR5p::GUS标记的生长素信号在Osiaa23突变体的静止区域缺失。在QHB启动子控制下,Osiaa23转基因植株能部分模拟Osiaa23突变体的表型缺陷。这表明水稻静止中心细胞的胚后维持依赖于在静止中心的OsIAA23介导的生长素信号。基于Aux/IAA的生长素信号转导对植物根尖的静止中心的胚后维持有着重要作用(Ni Jun.et al.(2011)OsIAA23-mediated auxin signaling defines postembryonic maintenance of QC in rice.)。因此对转录因子的研究,在理论上为进一步理解植物种子和器官发育调控的分子机理提供了新的线索,在实践上也将为作物高产育种提供理论基础。
发明内容
本发明的目的是提供水稻转录因子Os05g09480基因的应用。
为了实现本发明目的,本发明首先提供一种组成型水稻转录因子,即融合蛋白EAR-Linker-Os05g09480。
其中,EAR为来自植物转录因子的一段具有转录抑制功能的蛋白基序,其氨基酸序列如Seq ID No.2所示,或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。
Linker由1~39个柔性氨基酸串联而成(例如,GGGGG、GPPPG或Gatway载体重组位点编码的氨基酸序列DPAFLYKVVPR或INYPYDVPDYAGSYPYDVPDYAAQCSGTELTSLYKKAGF等)。
上述融合蛋白中涉及的Os05g09480为水稻转录因子Os05g09480,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列,其CDS序列如Seq ID No.3所示。
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