[发明专利]一种蛋花杏素的提纯工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛋花杏素的提纯工艺，属于医药领域。

背景技术

蛋花杏素（Fulvoplumierin），分子式为C₁₄H₁₂O₄，分子量244.25，结构式为：

蛋花杏素来源于夹竹桃科(Apocynaceae) 红鸡蛋花 Plumeria rubra L.的树皮。现代药理研究表明蛋花杏素具有细胞毒活性，对纤维肉瘤、黑色素瘤、乳癌、肺癌、结肠癌、KB细胞、P388的ED50(μg/mL)分别为3.4、0.7、3.5、3.0、1.3、4.6、2.5；能抗HIV-1逆转录酶(RT)，其IC50为45μg/mL，对HIV-1的IC50为98μg/mL，HIV-2为87μg/mL；能抑制人DNA连接酶Ⅰ(ligase Ⅰ)(IC50:87μg/mL)。

目前，国内尚未见蛋花杏素工业分离制备方法的相关报道。

发明内容

本发明目的是提供一种简单、提率较高的蛋花杏素提纯工艺。

本发明是通过以下技术方案实现的：

1）用醇类溶液对红鸡蛋花的树皮进行微波提取，得到提取液；

2）上述提取液减压回收乙醇至浸膏状，加热水溶解，滤出不溶物，滤液加入大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液；

3）上述洗脱液加入超滤膜超滤，透过液再加入纳滤膜浓缩，浓缩液干燥得到粗品；

4）上述粗品用热水溶解，放冷沉淀，过滤得到蛋花杏素。

所述步骤1）中对红鸡蛋花的树皮进行粉碎处理，控制粒径为20-60目。

所述步骤1）中醇类溶液为50-70%乙醇水溶液，优选55%乙醇水溶液。

所述步骤1）中固液体积比为1:8-1:13，优选1:10。

所述步骤1）中微波功率为1-10kw，提取2-3次，每次10-30min。

所述步骤2）中大孔树脂可选AB-8、D101、HPD100和HZ830中一种。

所述步骤2）中洗脱剂为3-5BV水→5-7BV60%乙醇。

所述步骤3）中超滤膜为截留分子量3000-10000的中空复合膜，纳滤膜为截留分子量100的中空复合膜，进口压力控制0.4-0.9Mpa。

所述步骤4）中热水控制温度为80-100℃，用量为粗品重量的8-10倍量（V/W）。

本发明采用大孔树脂吸附，富集量大，除杂质效果好；洗脱液用生物膜截流浓缩，能耗低，并且避免温度过高发生物质变化；步骤简单，无能耗，节省成本；工艺整个过程不使用挥发毒性溶剂，废液可回收再利用，安全环保。

 

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式：

实施例1：

将红鸡蛋花的树皮粉碎至20目，取5kg投入微波提取罐，加入50L55%乙醇溶液微波提取10min，微波提取功率为10kW，提取3次，合并提取液，减压回收乙醇至浸膏状加水溶解，滤出不溶物，滤液加入5L D101大孔树脂柱吸附，先15L水洗脱，再用20L60%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量3000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量100的中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.8Mpa，得浓缩液，浓缩液干燥得到粗品，用粗品重量的8倍量（V/W）的热水溶解，热水控制温度为80℃，放冷沉淀，过滤、冷冻干燥即得蛋花杏素红色针晶，含量为83.5%。

实施例2：

将红鸡蛋花的树皮粉碎至60目，取5kg投入微波提取罐，加入50L55%乙醇溶液微波提取30min，微波提取功率为1kW，提取2次，合并提取液，减压回收乙醇至浸膏状加水溶解，滤出不溶物，滤液加入5L AB-8大孔树脂柱吸附，先15L水洗脱，再用35L60%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量10000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量100的中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.5Mpa，得浓缩液，浓缩液干燥得到粗品，用粗品重量的5倍量（V/W）的热水溶解，热水控制温度为100℃，放冷沉淀，过滤、冷冻干燥即得蛋花杏素红色针晶，含量为82.9%。

实施例3：