[发明专利]一种大叶唐松草定碱的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，尤其是涉及一种大叶唐松草定碱的制备方法。

背景技术

大叶唐松草定碱属于异喹啉生物碱，分子式C39H44N2O8，分子量666.79，分子结构式：

大叶唐松草定碱具有抗肿瘤及抗疟疾等作用。大叶唐松草又名大叶马尾莲,为毛茛科唐松草属植物，具有清热；泻火；解毒的功效，现代研究发现大叶唐松草中含有大量生物碱如大叶唐松草宾碱、大叶唐松草定碱和大叶唐松草巴亭碱等。通过文献检索，大叶唐松草定碱的制备方法披露，多采用常规提取方法和硅胶柱分离。该方法提取效率低，分离过程复杂，溶剂用量大，不适合高纯度的大叶唐松草定碱的制备。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种操作简便、污染小的大叶唐松草定碱制备方法。

本发明的目的是采用以下技术方案实现的：一种大叶唐松草定碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

   （1）取大叶唐松草根粉碎20-80目，用氨水浸润，干燥后置于超临界CO2萃取罐中萃取，CO2流量为1-3ml/min/g原料，选用丙酮做夹带剂，流量为0.2-0.6ml/min/g原料，萃取温度30-60℃，压力15-30Mpa，萃取时间1-4h，解析得萃取物用盐酸水溶液溶解，滤液，用纳滤膜进行多级分子截留，所得液体用氯仿萃取，浓缩得粗提物；

   （2）上述粗提物以氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.5）为溶剂系统，按5-10:1-5:3-10混合，取上相做固定相、下相为流动相，采用高速逆流色谱法分离上述粗提物，根据色谱收集流分，减压浓缩干燥即得。

所述步骤（1）中的氨水为5%的氨水溶液。

述步骤（1）中的超临界萃取条件为：CO2流量为3ml/min/g原料，萃取温度45℃，压力25Mpa，萃取时间3h。

    所述步骤（1）中的纳滤膜多级分子截留为：先用截留分子量800-1000的中空纤维素纳滤膜膜进行分子截留，透过液再用截留分子量小于500的中纤维素纳滤膜浓缩。

采用本方法制备大叶唐松草定碱，提取效率高，污染小，所得产品纯度高，易于工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取大叶唐松草根粉碎20目，取5kg，用5%的氨水溶液浸润3小时，烘干，置于超临界CO2萃取罐中萃取，通入CO2流量为3ml/min/g原料，丙酮做夹带剂，流量为0.3ml/min/g原料，在萃取温度45℃，压力25Mpa，萃取时间3h，解析萃取物用1%盐酸水溶液溶解，滤液，先用截留分子量800的中空纤维素膜分子截留，透过液再用截留分子量500的中纤维素膜浓缩，所得液体用氯仿萃取3次，浓缩得粗提物。取氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.5）为溶剂系统，按5:2:4混合，取上相做固定相、下相为流动相，取上相注入高速逆流色谱管做固定相，取下相做流动相，流速2ml/min，主机转速900rpm，流动相溶解萃取物，进样，根据图谱收集流分，连续制备，流分合并浓缩干燥，得大叶唐松草定碱3.1g，经HPLC检测，含量97.3%。

实施例2：

取大叶唐松草根粉碎40目，取5kg，用5%的氨水溶液浸润4小时，烘干，置于超临界CO2萃取罐中萃取，通入CO2流量为2ml/min/g原料，丙酮做夹带剂，流量为0.5ml/min/g原料，在萃取温度40℃，压力20Mpa，萃取时间3h，解析萃取物用1%盐酸水溶液溶解，滤液，先用截留分子量1000的中空纤维素膜分子截留，透过液再用截留分子量400的中纤维素膜浓缩，所得液体用氯仿萃取4次，浓缩得粗提物。取氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.5）为溶剂系统，按7:4:6混合，取上相做固定相、下相为流动相，取上相注入高速逆流色谱管做固定相，取下相做流动相，流速3ml/min，主机转速800rpm，流动相溶解萃取物，进样，根据图谱收集流分，连续制备，流分合并浓缩干燥，得大叶唐松草定碱2.7g，经HPLC检测，含量96.5%。

实施例3：

取大叶唐松草根粉碎80目，取5kg，用5%的氨水溶液浸润2小时，烘干，置于超临界CO2萃取罐中萃取，通入CO2流量为1ml/min/g原料，丙酮做夹带剂，流量为0.6ml/min/g原料，在萃取温度60℃，压力23Mpa，萃取时间3h，解析萃取物用2%盐酸水溶液溶解，滤液，先用截留分子量900的中空纤维素膜分子截留，透过液再用截留分子量400的中纤维素膜浓缩，所得液体用氯仿萃取3次，浓缩得粗提物。取氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.5）为溶剂系统，按7:4:5混合，取上相做固定相、下相为流动相，取上相注入高速逆流色谱管做固定相，取下相做流动相，流速1ml/min，主机转速850rpm，流动相溶解萃取物，进样，根据图谱收集流分，连续制备，流分合并浓缩干燥，得大叶唐松草定碱2.8g，经HPLC检测，含量96.1%。