[发明专利]一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法

说明书

技术领域

     本发明属于农药残留分析技术领域，具体涉及一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法。

背景技术

     自上世纪80年代第一个新烟碱类杀虫剂上市以来，新烟碱类杀虫剂得到迅速发展。然而，随着长时间的施药，以吡虫啉为代表的新烟碱类杀虫剂田间抗性不断增加，开发新型新烟碱类杀虫剂显得十分必要。硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂是我国自主创制的一种新烟碱类手性杀虫剂，主要用于防治同翅目害虫，对稻飞虱和蔬菜蚜虫具有良好的防治效果（如哌虫啶对其防效均达90﹪以上)。在当今吡虫啉抗性不断增加的情况下，新型硝基亚甲基类新建杀虫剂是一类具有广阔市场潜力的新农药。

    根据我国农药登记相关规定，必须提供农药在环境中，尤其是施药对象（如蔬菜）中的残留情况。欧盟、美国等国家进一步要求必须提供农药在施药对象（如蔬菜）中代谢降解相关数据。我国在这方面起步较晚，但农业部已经就相关规定进行研究讨论，农药登记需提供农药在植物中的残留及代谢相关数据将成为必然趋势。

    为此，植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的提取、净化方法显得十分迫切。目前国内外鲜见提取植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的文献。且现有其他新烟碱类农药的方法都没有经过固相萃取分离纯化，会导致样品杂质过多，影响仪器使用寿命及检测结果的准确性。有的方法采用的填料去除杂质效果不明显，影响实验效率。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种操作简单、用时较少、且能有效去除干扰物质的植物中硝基亚甲基新烟碱杀虫剂的提取净化方法。

本发明方法是：

在植物样品中加入乙腈-水混合液混合均匀后，提取、离心，取上清液浓缩，得到浓缩液；将浓缩液过固相萃取柱，用甲醇-水混合液淋洗，甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到杀虫剂的提取液。

所述的植物样品为在液氮下将植物研磨成粉末状的植物组织。

所述的植物样品与乙腈-水混合液的体积比为4：1～1：4。

所述的乙腈-水混合液中乙腈与水的体积比为1：3～5，优选为2:8。

所述的甲醇-水混合液中甲醇与水的体积比为1：19～3：17，优选为1:9。

所述的提取可以选用振荡或超声等方法，本发明优选选用超声提取15min，离心为8000r/min离心10分钟，提取、离心步骤重复两次。

所述的过固相萃取柱前需依次用甲醇和水预淋洗萃取柱，可活化固相萃取柱。

所述的洗脱液浓缩后转移至棕色刻度定量浓缩瓶中，在氮吹仪下用氮气吹干，用乙腈定容至1mL。

所述的固相萃取柱内填充有400～500mg的石墨化碳黑，优选石墨化碳黑的填充量为500mg；该石墨化碳黑作为吸附剂。

     本发明方法可应用于提取净化土壤、果实类、根类作物、叶类作物、谷类与饲料作物及豆类与油籽类作物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂。 

     现有的提取方法中，有用玻璃层析柱进行过柱分离的，所用玻璃层析柱中吸附剂为大孔吸附树脂。大孔吸附树脂过滤效果较好，但其平衡、上样、淋洗、洗脱时间长，且填充不方便。有用C18作为吸附剂的，但C18对于极性较大的新烟碱类杀虫剂保留效果不好。本发明使用石墨化碳黑作为吸附剂，克服了上述缺陷，柱子平衡、上样、淋洗、洗脱时间短，且能够最大限度地去除干扰物，使后期的检测结果更为准确。

    本发明用超声提取、固相萃取柱分离纯化，具有提取时间短、效率高、净化效果好、回收率高等特点。

附图说明

图1为实施例2中第一组未经固相萃取柱纯化的液相检测图；

图2为实施例2中第二组经过固相萃取柱纯化的液相检测图；

图3为实施例2中第三组经过固相萃取柱纯化的液相检测图。

具体实施方式

    以下通过具体实施方式进一步解释本发明，实施例中如无特殊说明均为本领域常规实验手段。

实施例1.小白菜中哌虫啶的提取测定

 1. 植物样品制备

将小白菜种子在30℃下催芽，将催芽后的种子种在土壤中，在植株长至3叶期施药，长至5叶期收获，冷冻，液氮下磨碎，备用。

2. 超声、离心提取