[发明专利]一种食品中小分子化合物ELISA检测试剂盒的评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种ELISA检测试剂盒的评价技术，尤其涉及一种食品中农兽药残留、添加剂等小分子化合物ELISA检测试剂盒质量评价方法。 

背景技术

试剂盒在分析检测工作中主要是作为一种快速筛查的方法而存在，开始的时候是以传统经典方法的替代方法出现的，几乎所有的试剂盒方法在发现问题时都需要以传统的检测方法作为最终确认的依据(尤其是在食品理化及微生物检测中更是如此)，因此，人们大多认同试剂盒方法的一些方法学上的不稳定性，比如假阳性率、假阴性率、定量精密度较差等等，并接受了这种可能的结果错误。而恰恰是这种认同使得人们忽视了对试剂盒方法进行更为科学深入的方法学性能指标探讨，而这种忽视在一些敏感领域的分析中是十分危险的。 

目前，商品化试剂盒比较适合企业生产控制或执法现场检测，因其操作方便，结果可快速获得。但试剂盒的生产、销售及认证认可体制尚不完善，没有相应的标准或质量评价政策。且其灵敏度，稳定性及假阴／阳性控制尚不能满足检测需要。一方面是试剂盒的发展向好，而另一方而试剂盒存在的问题也愈来愈突出，尤其是许多国产试剂盒存在的质量问题限制了其发展。实验室检测人员尤其是企业实验室人员希望国家对试剂盒生产厂家进行管理，并对其产品进行验证，使购买者有信心使用国产检测试剂盒， 

正是基于目前试剂盒产品的现状，需要对试剂盒进行规范管理，以保证市场上流通的试剂盒性能指标满足相关要求。 

目前我国尚未有针对试剂盒的完整评价体系，食品安全领域是当前问题最多、最受关注的领域，这个领域的检测包括了物理、化学、微生物及分子生物学基础理论，无论是按检测原理、用途还是其它分类方式，涉及食品安全检测项目的试剂盒的品种是最全最多的。因此，从该领域着手从事评价制度的研究，便于获得基础性数据结果。 

国外自20世纪80年代末起就开始了对试剂盒的评价工作，取得了相当大的进展，获得了良好的效果。但出于种种原因，几乎现所有的评价体系都存在一些缺陷。最为关键的就是由于试剂盒品种繁多，事实上“试剂盒”这个术语至今没有规范的定义，在市场上销售的称之为“试剂盒”的产品各式各样，而不同的试剂盒检测原理差异悬殊，使得在构建评价体系的技术法规时存在相当大的技术难度，迄今为止，国内尚未开展对试剂盒的管理规范工作，而国外官方仅采用直接注册进行管理，国际上最为成功的评定机构之一AFNOR仅对微生物检测用试剂盒进行评价，依据是ISO16140《食品和动物饲料的微生物学替代检测方法验证准则》，而另一影响广泛的机构AOAC更多地依靠技术专家的力量，以专家小组来决定需要 验证的技术指标。 

鉴于目前国内外对可供借鉴的成熟的评价制度方案不多，而试剂盒本身的性质也使其不能直接照搬其他产品的评价方案和技术，同时，各种复杂的食品基质会引起诸多干扰因素，因此如何准确评价食品中小分子化合物ELISA检测试剂盒的评价有相当大的技术难度。 

发明内容

本发明的目的是提供一种食品中农兽药残留、添加剂等小分子化合物ELISA检测试剂盒的评价方法，以对待评价的商品化ELISA试剂盒作为更为准确的评价。 

本发明的评价方法，其特征在于包括：通过结合室内验证与室间协同实验两个评价单元，根据待评价试剂盒说明书提取特征参数设计评价指标，构架评价单元内各评价指标的计算模型，对食品中小分子化合物ELISA商品化试剂盒进行较为准确的评价。 

实验室内测试实验，包括： 

线性验证，用于寻找非随机模型，消除或降低潜在的关键变异； 

选择性验证，用于评价同类药物的交叉反应以及不同基体的交叉反应； 

基体适用性试验，用于评价对于不同食品基质，待评价试剂盒的准确度、重现性、检测限、定量限； 

耐变性试验，包括确定测试样品和数量，选择需要评价的耐变因素。用于评价可能影响检测结果的因素； 

批间变异与稳定性，用于评价待评价试剂盒的产品稳定性。 

其中，核心的基体适用性试验步骤包括：确定适用的基体范围、准确度验证、偏离计算、重复性评价、检测限和定量限确证。 

实验室间协同实验，包括： 

准确度验证，用于评价在不同实验室、不同操作人员情况下，待评价试剂盒的准确度。 

采用该评价方法，能够对待评价的商品化ELISA检测试剂盒作出较为准确的评价。 

具体实施方式

本发明的评价步骤如下： 

(一)室内验证单元 

1、线性验证