[发明专利]一种从组织中获取干细胞的装置及其方法有效
申请号: | 201310385503.0 | 申请日: | 2013-08-30 |
公开(公告)号: | CN103484365A | 公开(公告)日: | 2014-01-01 |
发明(设计)人: | 谭建明;陈津;马予洁;黄梁浒;徐秀敏 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军南京军区福州总医院 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12N5/0735;C12N5/0775 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 修斯文;蔡学俊 |
地址: | 350025 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织 获取 干细胞 装置 及其 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种从组织中获取干细胞的装置及其方法。
背景技术
干细胞是具有自我更新能力、在特定的条件下可以分化成不同类型功能细胞的一类细胞。干细胞研究及应用能够突破传统医学发展的限制,有望解决人类面临的重大医学难题,现今已为移植治疗、神经系统疾病治疗、基因治疗、研究胚胎发育和疾病发生以及药物筛选和开发等提供了可行的方法。成体干细胞可以取自患者自身,在应用时不存在组织相容性的问题,避免了移植排斥反应。
研究者发现,干细胞可以来源于众多组织中,如骨髓、脂肪、脐带、胎盘、蜕膜、羊膜、羊水、皮肤,肌肉,牙髓、血管、心脏、脾、肾周脂肪、肠上皮组织等。而干细胞的分离主要采用经胶原酶、胰蛋白酶、中性组织分散酶等一种或几种组合酶消化的方式,从组织中分离出干细胞,进行进一步的培养扩增。然而现有的干细胞分离方法都是基于试验研究的方式,尚还缺乏一套完整的,适用于各种组织来源的干细胞分离装置。
发明内容
鉴于现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种从组织中分离干细胞的装置及其使用方法,该装置的结构合理,并结合该装置的使用方法,可以安全、方便、快捷、有效地从不同组织中获取干细胞。
本发明的第一技术方案是:一种从组织中获取干细胞的装置,包括组织消化罐,试剂瓶,蠕动泵及收集装置,所述获取干细胞的装置还包括有三通阀,所述组织消化罐通过管道与三通阀进液口相连接,所述试剂瓶与收集装置通连接管别与三通阀的两个出液口相连接,所述试剂瓶内还设有出液管,所述出液管夹于蠕动泵上并与组织消化罐相连接。
进一步的,所述出液管包括前段出液管与后段出液管,所述前段输液管与后段输液管之间通过不锈钢弯管连接,所述的不锈钢弯管放置于可调节温度装置(水浴锅)中。
进一步的,所述组织消化罐包括罐体与盖于罐体上方的旋盖,所述罐体开口处设有第一滤网,所述旋盖上设有用于连接管道的通孔,所述的组织消化罐罐底设有一磁力发生装置,所述磁力发生装置上放置有若干个磁珠,所述组织消化罐侧壁上还延伸有用于与后段出液管相连接的插孔。
进一步的,所述的收集装置包括一漏斗状瓶体,所述瓶体瓶颈设有第二滤网,瓶底漏斗状尖口处设有开口,所述瓶体下方设有收集瓶。
进一步的,所述可调节温度装置为水浴锅。
进一步的,所述组织消化罐罐体与旋盖间还设有防止消化罐液体外漏的密封圈。
本发明的第二技术方案是:一种从组织中获取干细胞的方法,包括如上述权利要求1所述一种从组织中获取干细胞的装置,并按以下步骤进行:
(1)将待分离的组织放入组织消化罐内;
(2)在试剂瓶中加入磷酸盐缓冲液或生理盐水;
(3)三通阀旋至使组织消化罐与收集装置相连通的状态,启动蠕动泵,将试剂瓶中的试剂泵入组织消化罐中清洗组织,并将组织消化罐内清洗后的试剂排入收集装置中;
(4)待消化罐中内清洗试剂完全泵入收集装置后,更换新的收集装置,同时三通阀旋至使组织消化罐与试剂瓶相连通的状态;
(5)在试剂瓶中加入消化酶,将消化酶经出液管泵入组织消化罐中,机械震荡组织消化罐,使组织消化罐中的组织在消化酶及机械力的作用下分解;
(6)在步骤(5)持续20~60分钟后,将三通阀旋至与收集装置相连接,将组织消化罐中的干细胞输入至收集装置中。
进一步的,在步骤(5)中所述出液管包括前段出液管与后段出液管,所述前段输液管与后段输液管之间通过不锈钢弯管连接,所述的不锈钢弯管放置水浴锅中,所述的水浴锅温度为37℃。
进一步的,所述的消化酶为胶原酶、胰蛋白酶或混合酶。
本发明的第三技术方案是:一种从组织中获取干细胞的方法,其特征在于,包括如上述权利要求1所述一种从组织中获取干细胞的装置,并按以下步骤进行:
(1)将待分离的组织放入组织消化罐内;
(2)在试剂瓶中加入磷酸盐缓冲液或生理盐水;
(3)三通阀旋至使组织消化罐与收集装置相连通的状态,启动蠕动泵,将试剂瓶中的试剂泵入组织消化罐中清洗组织,并将组织消化罐内清洗后的试剂排入收集装置中;
(4)待组织消化罐中内清洗试剂完全泵入收集装置后,更换新的收集装置;
(5)机械震荡组织消化罐20~60分钟后,将三通阀旋至使组织消化罐与收集装置相连通的状态,将组织消化罐中的干细胞输入至收集装置中。
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