[发明专利]一种具有免疫活性的大米酶解硒多肽的制备方法

权利要求书

1.一种具有免疫活性的大米酶解多肽的制备方法，其特征在于包括如下步骤和工艺条件： 

(1)原料预处理：取新鲜富硒碎米，研磨，过100目筛； 

(2)脱脂：用正己烷，料液比为1∶3～1∶6，在磁力搅拌器(79-1，常州国华电器有限公司)上脱脂两次，每次4h，离心，将沉淀放在通风橱中风干一夜； 

(3)碱提：用浓度为0.05mol/L～0.07mol/L的NaOH溶液，料液比1∶10～1∶20，温度35～45℃，时间2h～3h，碱提2次，离心，合并上清液； 

(4)酸沉：将所得蛋白质水解液放在磁力搅拌器上，边搅拌边用稀盐酸溶液调节至等电点(4.5～5.0)，待沉淀析出，再离心，水洗2次； 

(5)冻干：将上述所得蛋白质用培养皿装好放入冰箱，在-20℃下预冻一夜，第二天放进冷冻干燥机冻干(FD-1C，西班牙Telstar公司)24小时，取出后装入自封袋； 

(6)酶解：将上述所得蛋白干粉在胰蛋白酶与底物浓度比1∶8～1∶10，底物浓度50～70g/L，pH8.5～9.0，温度40～50℃的条件下酶解2h～3h，离心收集上清液； 

(7)冻干：将上述所得酶解液用培养皿装好放入冰箱，在-20℃下预冻一夜，第二天放进冷冻干燥机冻干24小时，取出后装入自封袋。 

2.根据权利要求1所述的大米硒多肽制备方法，其特征在于(2)脱脂：用正己烷，料液比为1∶3～1∶6，在磁力搅拌器上脱脂两次，每次4h，离心，将沉淀放在通风橱中风干一夜。 

3.根据权利要求1所述的大米硒多肽制备方法，其特征在于(3)碱提：将脱脂富硒大米粉用NaOH浓度为0.05～0.07mol/L，料液比1∶10～1∶20，温度35～45℃，时间2～4h。 

4.根据权利要求1所述的大米硒多肽制备方法，其特征在于(6)酶解：将上述所得蛋白干粉在胰蛋白酶与底物浓度比1∶8～1∶10，底物浓度50～70g/L，pH8.5～9.0，温度40～50℃的条件下酶解2h～3h。