[发明专利]伪狂犬病毒、伪狂犬病疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及伪狂犬病毒和伪狂犬病疫苗及其制备方法。

背景技术

伪狂犬病（Porcine Pseudorabies）是由伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus,PRV）引起的发生在多种家畜和野生动物体内的一种急性传染病，以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要发病症状。伪狂犬病最早在1813年发生于英国的牛群中。Aujeszky、Schmiedhoffer和Sangirg相继发现并分离出PRV。成年猪常表现为隐性感染，妊娠母猪感染后可引起流产、死胎以及呼吸系统疾病症状，无奇痒。新生仔猪感染后除了出现神经症状外，还可侵害消化系统。本病呈世界性分布。猪既是本病原的原发感染宿主，又是病毒的长期贮存者和排毒者，在伪狂犬病的传播上起着重要作用。伪狂犬病给猪养殖业造成的危害仅次于猪瘟。

20世纪60年代以后，据报道，由于强毒株的出现，该病现已遍及欧洲、东南亚、南美洲、中美洲及非洲等50多个国家和地区，仅芬兰、挪威等少数国家仍无伪狂犬病的报道。我国周边一些国家如泰国、韩国、日本、菲律宾、老挝、马来西亚、新加坡、越南等均有伪狂犬病的流行。伪狂犬病的传播和蔓延，给养殖业造成了巨大损失，全世界每年因伪狂犬病造成的经济损失高达数十亿美元，因此该病引起了世界各国的高度重视。

到目前为止，已有北京、河南、上海、广东、广西、江苏、江西、福建、浙江、安徽、四川、陕西、甘肃、黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、台湾等20多个省(市)、自治区和香港特区报道发现了该病。PR在中国主要为地方性流行，特别对种猪场和集约化猪场危害严重，目前该病在我国的流行仍在不断地蔓延扩大，已经造成了严重的经济损失，成为影响我国畜牧业特别是猪养殖业发展的重要制约因素。

鉴于上述，生产一种安全性及免疫原性好，且免疫保护期长的伪狂犬病疫苗是预防和控制伪狂犬病的一种行之有效的方法。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此，本发明的目的在于提出一种伪狂犬病毒和伪狂犬病疫苗及其制备方法。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种伪狂犬病毒，根据本发明的实施例，该伪狂犬病毒以保藏编号CGMCC No.8057保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，根据本发明的具体实施例，所述的伪狂犬病毒是从经过正常免疫的患有猪伪狂犬病的病猪体内筛选分离得到，其毒价TCID₅₀为10^7.5/ml，因此，所述的伪狂犬病毒株毒性好，具有良好的免疫原性，可作为灭活疫苗生产毒株及检验毒种。

在本发明的第二方面，本发提出了上述伪狂犬病毒在制备伪狂犬病疫苗中的用途，在本发明一个实施例中，根据伪狂犬病毒交叉免疫保护试验证明，所述的伪狂犬病毒具有很好的交叉免疫保护作用。因此利用该伪狂犬病毒生产伪狂犬病疫苗，可以有效提高伪狂犬病疫苗的免疫原性，从而进一步提高伪狂犬病疫苗安全性及免疫保护期。

在本发明的第三方面，本发明提出了一种伪狂犬病疫苗，根据本发明的实施例，该伪狂犬病疫苗包括灭活的伪狂犬病毒以及佐剂。从而有效提高伪狂犬病疫苗的免疫原性，进一步提高伪狂犬病疫苗安全性及免疫保护期。

根据本发明的实施例，本发明的上述实施例的伪狂犬病疫苗还包括如下附加技术特征：

根据本发明的一个实施例，所述的伪狂犬病疫苗是通过β-丙内酯灭活的，由此可以有效提高伪狂犬病疫苗的免疫原性，同时可以进一步提高伪狂犬病疫苗安全性及免疫保护期。

根据本发明的一个实施例，所述的伪狂犬病疫苗所采用的佐剂为MARCOL52。从而有效提高伪狂犬病疫苗的免疫原性，进一步提高伪狂犬病疫苗安全性及免疫保护期。

根据本发明一个实施例，在所述的伪狂犬病疫苗中，所述伪狂犬病毒与所述佐剂的比例为（2：3）～（2：4），由此可以提高伪狂犬病疫苗的免疫原性，同时可以进一步提高伪狂犬病疫苗安全性及免疫保护期。

在本发明的第四方面，本发明提出了一种制备伪狂犬病疫苗的方法，根据本发明的实施例，该方法包括对所述的伪狂犬病毒进行灭活，以便获得经过灭活的伪狂犬病毒；以及将所述经过灭活的伪狂犬病毒与佐剂混合，以便获得所述伪狂犬病疫苗。由此，可以有效提高伪狂犬病疫苗的免疫原性，从而进一步提高伪狂犬病疫苗安全性及免疫保护期。

根据本发明的一个实施例，本发明上述实施例的制备伪狂犬病疫苗的方法还包括如下附加技术特征：