[发明专利]脂肪间充质干细胞在制备肝癌化疗增敏制剂中的应用

权利要求书

1.携带miR-122的脂肪来源的间充质干细胞的构建方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）脂肪来源的间充质干细胞的制备：脂肪组织经DPBS清洗后，用Ⅰ型胶原酶37℃消化1小时，然后室温离心后弃去上层油脂和液体，细胞沉淀以DPBS重悬洗涤2遍后离心收集细胞，接种在含5%胎牛血清的低糖DMEM培养基的培养瓶内，细胞贴壁增殖接近80%融合时，进行消化、传代，依此法传代2-4次，达到纯化和扩增间充质干细胞的目的，收集细胞冻存、复苏备用；

2）携带miR-122的脂肪来源的间充质干细胞的制备：miR-122表达质粒通过电转法导入AMSC，以EGFP指示转染效率，以转染无关miRNA的表达质粒作为对照，以表达质粒所带的Blasticidine抗性基因进行筛选,筛选4-6周后可获得稳定表达miR-122的携带miR-122的脂肪来源的间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述脂肪组织为成人脂肪组织，所述miR-122为has-miR-122。

3.根据权利要求1或2所述方法得到的携带miR-122的脂肪来源的间充质干细胞，其特征在于：具有间充质干细胞的基本特性。

4.根据权利要求1或2所述方法得到的携带miR-122的脂肪来源的间充质干细胞，其特征在于：可提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性。

5.根据权利要求4所述的携带miR-122的脂肪来源的间充质干细胞，其特征在于：所述肝癌细胞为HepG2细胞。

6.携带miR-122的脂肪来源的间充质干细胞在制备肝癌化疗增敏制剂的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述肝癌化疗增敏制剂可提高异位肝癌和原位肝癌对肝癌化疗药物的敏感性。

8.权利要求7所述的应用，其特征在于：所述肝癌化疗药物为Sorafenib、5-FU或Doxorubicin。

9.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于：所属制剂的剂型为注射剂。