[发明专利]一种区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法有效
| 申请号： | 201310391796.3 | 申请日： | 2013-09-02 |
| 公开（公告）号： | CN103409562A | 公开（公告）日： | 2013-11-27 |
| 发明（设计）人： | 万春和;黄瑜;陈红梅;施少华;程龙飞;傅光华;傅秋玲;潘异哲 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350013 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 区别 细小 病毒 pcr rflp 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）提取鹅细小病毒和番鸭细小病毒基因组DNA；
（2）用引物P1和P2同时对鹅细小病毒和番鸭细小病毒进行PCR扩增，得到相应的NS基因片段；
（3）取PCR产物经EcoRⅠ酶切后进行RFLP分析。
2.根据权利要求书1中所述的区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法，其特征在于：所述的步骤（2）的扩增引物P1和P2的序列为：
上游引物P1：5’- CAAAATAAGACCGTGACT -3’，
下游引物P2：5’- ACAGGAGTAGGTTCAATACAAACA -3’。
3.根据权利要求书1中所述的区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法，其特征在于：所述的步骤（2）PCR扩增产物经胶回收大小为810bp。
4.根据权利要求书1中所述的区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法，其特征在于：所述的步骤（3）EcoRⅠ酶切位点位于番鸭细小病毒基因组NS基因序列的973位，番鸭细小病毒可被EcoRⅠ酶切后经琼脂糖凝胶电泳检测片段为2段，大小为530bp和280bp；而鹅细小病毒基因组NS基因中没有EcoRⅠ酶切位点，鹅细小病毒经EcoRⅠ酶切后经琼脂糖凝胶电泳检测片段大小不变。
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