[发明专利]一种用于鉴别泡菜生花病害菌的微生物纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品病害微生物鉴别技术领域，具体是提供一种简单且准确的用于鉴别泡菜生花病害茵的微生物纯化方法。

背景技术

泡菜，是指经过发酵的蔬菜，古称葅。我国泡菜历史悠久，流传广泛，我国最早的诗集《诗经》中有“中田有庐，疆场有瓜是剥是菹，献之皇祖”的诗句。庐和瓜是蔬菜，“剥”和“菹”是腌渍加工的意思。据汉许慎《说文解字》解释“菹菜者，酸菜也”。说明至迟在3100多年前的商代武丁时期，我国劳动人民就能用盐来渍梅烹饪用。由此可见，我国的盐渍菜应早于《诗经》，应起源于3100年前的商周时期。

一般来说，只要是纤维丰富的蔬菜或水果，都可以被制成泡菜，是一种既营养又卫生的蔬菜加工品。因为泡菜的主要原料是各种蔬菜，维生素及钙、铁、磷等矿物质含量丰富，其中豆类还含有丰富的全价蛋白质。在泡制过程中，蔬菜的温度一直保持在常温下，蔬菜中的维生素C和B族维生素不会受到破坏，因此，泡菜比起炒菜来营养价值更高。泡菜富含乳酸，一般为0.4％～0.8％，可刺激消化腺分泌消化液，帮助食物的消化吸收。同时，发酵生成的左旋乳酸易被人体利用。泡菜中的乳酸菌群可抑制多种病原菌的生长繁殖，如痢疾杆菌在泡菜中经3～6小时、霍乱菌经1～2小时、伤寒菌经2～9小时均能被杀灭。新鲜蔬菜上所沾附的蛔虫卵，在密封的泡菜坛内也会因缺氧窒息死亡。因此，常吃泡菜可以增加肠胃中的有益菌，抑制肠道中的致病菌，降低患胃肠道疾病的几率，增加身体抵抗力。此外，蔬菜中含有一定量的蛋白质，在加工泡菜过程中，蛋白质由于受到微生物和蛋白质水解酶的作用，逐渐被分解为小分子多肽物质直至氨基酸。这是一种重要的生物化学变化，使腌制品不仅产生一定的光泽、香气和风味，还促进了营养物质的吸收，增加了食物的营养价值。因而泡菜既能为人体提供充足的营养，又能预防动脉硬化等疾病。

泡菜以其独特的风味以及丰富的营养价值，受到世界各地越来越多人们的喜爱。但由于各种原因，我国泡菜出口总额还比较低，其中影响最大的是泡菜生产的工业化改造技术还不够成熟，工业化生产出来的泡菜质量不及传统法生产出来的泡菜，而工业化生产泡菜过程中“生花”的侵害最大，给泡菜质量和产量带来的损失也是最大。

在泡菜生产过程中常常易出现“生花”病害也叫产膜，俗称“臭风”，会散发一种令人不愉悦的气味，而且会产生涩味，使受侵害泡菜口感和营养价值比正常发酵泡菜差很多。常出现在啤酒、酱油、果汁、葡萄酒及泡菜的生产过程中。主要是由氧化性酵母(包括假丝酵母和毕氏酵母等)所引起的，同时还附带产生不愉快气味。目前，国内外还没有学者对泡菜“生花”现象进行比较系统的研究。在工业化生产中，鉴别生花泡菜的方法只能单纯依靠工人的经验人工进行粗略的鉴定和分离。如何在鉴别泡菜是否受到生花病害菌污染的过程中对待鉴定的生花病害疑似菌准确地提取出来并在较大程度上剔除影响鉴定的杂菌，将疑似菌进行纯化用于进一步鉴定是加工技术的一个重要待解决问题。

因此提供一种简单且准确的用于鉴别泡菜生花病害菌的微生物纯化方法，帮助工人避免“生花”病原菌对泡菜生产带来的不利影响，也为其它农产品深加工中类似问题提供参考。

发明内容

针对现有生产存在的技术问题，本发明的目的是提供一种操作简单、安全可靠、成本低廉的用于鉴别泡菜生花病害菌的微生物纯化方法。

本发明采用传统微生物鉴定方法对泡菜“生花”病害微生物进行挑取，并进一步对挑取得到的产物进行培养纯化。具体技术方案为一种用于鉴别泡菜生花病害菌的微生物纯化方法，其特征在于包括步骤：

1)取样接种：取出现“生花”现象的泡菜液液面上层白色物质作为样品，接种于培养基上，置于31～35℃恒温培养箱中恒温培养6～7d，观察菌落生长状况；

2)分选纯化：将培养后的疑似菌单菌落接种培养于新的培养基上，重复5～6次进行纯化；

3)取菌：挑取病害菌纯培养物，以备用于进一步鉴定。

本发明通过对疑似生花病害微生物接种培养，利用不同种类的微生物不同的生长特性和菌落特征得以将目标病害疑似菌挑取出来，并多次重复纯化过程从而达到将杂菌剔除，获得待鉴定目标病害疑似菌的纯培养物。本发明方法具有实验简单、成本低廉、易操作实施、重复性好等优点。

附图说明

图1是本发明用于鉴别泡菜生花病害菌的微生物纯化方法步骤示意图；

具体实施方式

以下将结合具体实施例和说明书附图对本发明做进一步详细说明。

实施例1

试验原料和试剂

1)泡菜疑似菌：出现“生花”现象的泡菜液中取液面上层白色物质；