[发明专利]一种新的耳聋相关基因突变检测体系及试剂盒

权利要求书

1.一种耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于：通过使用多重PCR引物及检测探针检测耳聋基因突变位点中是否存在突变，所述耳聋基因突变位点包括CEACAM16基因（NM_001039213.2）c.418A>C突变位点。

2.根据权利要求1所述的耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于：所述耳聋基因突变位点包括

共32个耳聋基因突变位点。

3.根据权利要求2所述的耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于，包括以下反应步骤：

1）将检测样本进行多重PCR反应；

2）多重PCR产物纯化；

3）分型连接反应；

4）荧光检测。

4.根据权利要求3所述的耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于：所述多重PCR反应包括

待测DNA样本，

双蒸馏水，

2xGC I缓冲液，

2价镁离子溶液，

脱氧核糖核苷三磷酸，

引物混合液，

热稳定性的DNA聚合酶；

并进行PCR循环程序。

5.根据权利要求4所述的耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于：所述引物混合液为18对多重PCR引物，所述的引物对的序列如SEQ ID NO.:1至SEQ ID NO.:36所示。

6.根据权利要求3所述的耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于：所述多重PCR产物纯化为在PCR产物中加入1酶单位的SAP酶和1酶单位的Exonuclease I酶，温浴后灭活。

7.根据权利要求3所述的耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于：所述分型连接反应包括

多重PCR产物，

10x连接酶缓冲液，

4xGC溶液，

Taq连接酶，

标记混合液，

PiMLDR混合液，

双蒸馏水；

并进行循环反应。

8.根据权利要求7所述的耳聋相关基因突变检测体系，其特征在于：所述PiMLDR混合液为32组检测探针，每组检测探针包含2条鉴别探针及1条通用探针，所述的检测探针的序列如SEQ ID NO.:37至SEQ ID NO.:132所示。

9.一种耳聋相关基因突变检测试剂盒，其特征在于，包括：

双蒸馏水；

2xGC I缓冲液；

2价镁离子溶液；

脱氧核糖核苷三磷酸；

引物混合液；

热稳定性的DNA聚合酶；

SAP酶；

Exonuclease I酶；

10x连接酶缓冲液；

4xGC溶液；

Taq连接酶；

标记混合液；

PiMLDR混合液。