[发明专利]一种从猪睾丸中提取玻璃酸酶的方法

权利要求书

1.一种从猪睾丸中提取玻璃酸酶的方法，其特征在于，采用酸液提取和硫酸铵盐析得玻璃酸酶粗品，粗品再经超滤、热原处理、冻干得玻璃酸酶精品。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(一)提取：

将猪睾丸除内外皮层及付睾丸，绞成糜浆，称取糜浆加酸液，搅拌、浸渍，过滤，滤液调pH；取滤渣再加酸液，搅拌、过滤，滤液调pH；

(二)粗制：

合并步骤(一)中的两次滤液，在搅拌下，加入固体硫酸铵，搅拌溶解，静置，过滤，留固体；量取滤液，在搅拌下，加入固体硫酸铵，溶解，静置，过滤，合并两次固体，得粗品；

(三)精制：

(1)超滤

粗品溶于水中，进行超滤；

(2)热原处理：

将超滤液离心，过滤，将滤液放冰浴中冷却，在滤液中加入磷酸三钠(Na₃PO₄·12H₂O)溶液，在搅拌下，再缓缓加入醋酸钙(Ca(CH₃COO)₂·H₂O)溶液，并调pH至8-9，离心，收集上清液，之后将上清液调pH至6.5～7.0；

(3)冻干

将滤液冷冻干燥，即得玻璃酸酶精品。

3.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，第一次每1kg糜浆加酸液1.0-1.5L，第二次酸液仍根据开始糜浆量加入，每1kg糜浆加酸液0.2-0.3L。

4.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，酸液提取后调节滤液的pH值均至3.2～4.0。

5.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(二)中，第一次每1L滤液加固体硫酸铵230-260克，第二次每1L滤液加固体硫酸铵280-310克。

6.权利要求书2所述的方法，其特征在于，步骤(三)的(2)中的超滤液在过滤前以及调pH值至8-9后都要进行离心，离心时间：20分钟～30分钟，转速：2700～3200r／min。

7.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，所述酸液为冰醋酸，1mol／L盐酸，氯化钠和水的混合酸液。

8.权利要求书7所述的方法，其特征在于，所述混合酸液中冰醋酸，1mol／L盐酸，水的体积百分比为1-5∶10-20∶150-220，氯化钠的浓度为0.10-0.20mol／L。

9.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(三)中，磷酸三钠溶液的质量浓度为10％-20％，其加入量为滤液体积的5％-15％。

10.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(三)中，醋酸钙溶液的质量浓度为15％-25％，其加入量为滤液体积的5％-10％。