[发明专利]一种基于氨基酸的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法有效
申请号: | 201310401114.2 | 申请日: | 2013-09-05 |
公开(公告)号: | CN104422741A | 公开(公告)日: | 2015-03-18 |
发明(设计)人: | 许国旺;张俊杰;路鑫;赵春霞;常玉玮;赵燕妮;沈丹红 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 刘阳 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 氨基酸 烟草 代谢 组学中 新鲜 烟叶 样品 质量 判别 方法 | ||
1.一种对代谢组学研究中的烟草鲜叶样本质量进行判别的方法,其特征在于:通过检测烟草鲜叶中谷氨酸与谷氨酰胺含量,计算其比值,对代谢组学研究中的烟草鲜叶样本质量进行判别。
2.根据权利要求1所述判别方法,其特征在于:其具体方法为:将烟草鲜叶中加入含内标的提取溶剂,提取后离心过滤,采用6-氨基喹啉-N-琥珀酰亚胺甲酯(AQC)衍生后,利用超高效液相色谱-单四级杆质谱(UPLC-SQDMS)进行分析,通过标准曲线计算得出谷氨酰胺和谷氨酸的含量。
3.根据权利要求2所述判别方法,其特征在于:所述内标为降缬氨酸,其含量为5mg/L,所述提取溶剂为含乙醇70%的水溶液;所述烟草鲜叶与含内标的提取溶剂按质量/体积比加入量为=35:1-3。
4.根据权利要求1所述判别方法,其特征在于:超高效液相色谱-单四级杆质谱(UPLC-SQDMS)的条件为:色谱柱Waters UPLC C18column;流动相A:20mM甲酸铵,0.5%甲酸,1%乙腈,98.5%水,流动相B:1.6%甲酸,98.4%乙腈(v/v);流速:0.35mL/min;柱温:55℃;进样体积:1μL;进样器温度:15℃;洗脱梯度为:0-1.08min,0.1%-0.1%B;1.08-11.48min,0.1%-9.1%B;11.48-16.3min,9.1%-21.2%B;16.3-16.9min,21.2%-59.6%B;16.9-18.1min,59.6%-59.6%B;18.1-18.28min,59.6%-0.1%B,18.28-20min,0.1%-0.1%B;质谱方法:ESI正离子模式下,分段SIR扫描,毛细管电压:3KV,锥孔电压:30V,脱溶剂气温度:300℃,锥孔温度:120℃,脱溶剂气流量:650L/h,锥孔气流量:50L/h。
5.根据权利要求1所述判别方法,其特征在于:所述烟草鲜叶是经-196℃液氮罐保存运输,液氮冷冻研磨,冻干,-80℃冰箱保存待用。
6.根据权利要求1所述判别方法,其特征在于:以谷氨酸与谷氨酰胺含量的比值为指标,建立区分代谢组学正常样本、部分褐化及褐化样本的标准,即待测样本中谷氨酸与谷氨酰胺比值在0.67以上的为合格样本,用于烟草代谢组学分析;谷氨酸与谷氨酰胺比值在0.12以下的为变质的不合格样本,谷氨酸与谷氨酰胺比值介于0.12与0.67之间为部分质变的不合格样本。
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