[发明专利]一种谷翠碱甲的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种谷翠碱甲的制备方法。

背景技术

谷翠碱甲为二萜生物碱，白色无定型粉末，分子式C23H37NO7，分子式440.26，分子结构式：

谷底翠雀是毛茛科翠雀花属植物，具有镇痛、镇静、祛风湿、杀虫等功效，全草含有大量生物碱成分。通过文献检索，现有从谷底翠雀中制备谷翠碱甲的方法多采用硅胶柱层析法。如文献“谷地翠雀花中生物碱的”公开的方法采用离子柱、萃取及硅胶柱分离。此类方法操作复杂，溶剂用量大，产品收率低，而且重现性差。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术不足和缺陷，提供一种操作简单的谷翠碱甲的制备方法。

本发明的目的是采用以下技术方案实现的：一种谷翠碱甲的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

1）取谷地翠雀花全草粉碎，加入5-10倍量50%-90%甲醇溶液超声提取，提取液减压浓缩至无醇，加适量盐酸水溶液稀释后用超滤膜超滤，透过液再用纳滤膜浓缩，浓缩液用氨水调节ph9-11后用氯仿萃取，萃取液回收试剂，得浸膏；

2）上述浸膏采用高速逆流色谱仪分离，以氯仿、甲醇和水为溶剂系统，紫外检测器在线检测，收集流分，减压浓缩，低温干燥即得。

步骤1）中的超滤膜为截留分子量3000-10000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量不大于300的分子量中空纤维素纳滤膜。

步骤2）中的氯仿、甲醇和水为溶剂系统混合比例为：3-7:1-3:2-5，取上相做固定相，下相做流动相。

采用本方法制备谷翠碱甲，工艺操作简单，产品收率高，而且污染小，适合高纯度产品谷翠碱甲的生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取谷地翠雀花全草10kg粉碎，加入10倍量70%甲醇溶液超声提取3次，提取液减压浓缩至无醇，加适量5%盐酸水溶液稀释后用截留分子量3000的中空纤维素膜超滤，透过液再用截留分子量300的中空纤维素膜纳滤浓缩，浓缩液用氨水调节ph9后用氯仿萃取2次，萃取液回收试剂，得浸膏。取氯仿、甲醇和水按3:1:2比例混合，取上相注入高速逆流色谱管，主机转速800rpm，泵入下相做流动相，流速2ml/min，流动相溶解浸膏，紫外检测器在线检测，收集流分，减压浓缩，低温干燥白色谷翠碱甲3.5g，经HPLC检测，含量98.3%。

实施例2：

取谷地翠雀花全草10kg粉碎，加入5倍量90%甲醇溶液超声提取3次，提取液减压浓缩至无醇，加适量5%盐酸水溶液稀释后用截留分子量6000的中空纤维素膜超滤，透过液再用截留分子量300的中空纤维素膜纳滤浓缩，浓缩液用氨水调节ph11后用氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得浸膏。取氯仿、甲醇和水按5:2:4比例混合，取上相注入高速逆流色谱管，主机转速900rpm，泵入下相做流动相，流速3ml/min，流动相溶解浸膏，紫外检测器在线检测，收集流分，减压浓缩，低温干燥白色谷翠碱甲4.3g，经HPLC检测，含量98.6%。

实施例3：

取谷地翠雀花全草10kg粉碎，加入10倍量50%甲醇溶液超声提取3次，提取液减压浓缩至无醇，加适量10%盐酸水溶液稀释后用截留分子量3000的中空纤维素膜超滤，透过液再用截留分子量300的中空纤维素膜纳滤浓缩，浓缩液用氨水调节ph10后用氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得浸膏。取氯仿、甲醇和水按7:3:5比例混合，取上相注入高速逆流色谱管，主机转速700rpm，泵入下相做流动相，流速1ml/min，流动相溶解浸膏，紫外检测器在线检测，收集流分，减压浓缩，低温干燥白色谷翠碱甲3.8g，经HPLC检测，含量97.1%。