[发明专利]发酵制备赖氨酸盐的方法及其产品

权利要求书

1.发酵制备含L-赖氨酸硫酸盐的产品的方法，其包括：

（1）将编码氨基酸序列如SEQ ID No：l所示的蛋白的多核苷酸克隆入pET-20b(+)质粒，然后将该重组质粒导入大肠杆菌菌株W3110(tryA)/pCABD2中，获得产L-赖氨酸的菌株W3110(tryA)/pCABD2-sigma；

(2)在发酵条件下液体培养步骤(1)获得的菌，并收集培养的上清液；

所述发酵条件为：将菌株接入液体LB培养基中振荡培养至OD₅₀₀达到0.35，以5％的接种量接入赖氨酸发酵培养基中以36℃振荡培养72小时，每升赖氨酸发酵培养基配方为：100g葡萄糖，60g (NH₄)₂SO₄，50g CaCO₃，35mL蛋白胨-B，1g KH₂PO₄，400mg MgSO₄·7H₂O，200mg L-甲硫氨酸，10mg FeSO₄·7H₂O，8.1mg MnSO₄·4H₂O，300μg生物素和200μg维生素B1，用Tris-HCl调节至pH 7；

所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸：

赖氨酸51.5~53.5份；

天冬氨酸1.45~1.6份；

苏氨酸0.9~1份；

丝氨酸0.5~0.6份；

谷氨酸2.2~2.6份；

甘氨酸0.85~1份；

丙氨酸1.3~1.5份；

缬氨酸0.85~1份；

甲硫氨酸0.35~0.48份；

异亮氨酸0.55~0.65份；

亮氨酸1.2~1.35份；

酪氨酸0.6~0.75份；

苯丙氨酸0.6~0.7份；

组氨酸0.9~1.05份；和，

精氨酸1~1.2份；

（3）向步骤(2)获得的上清液中加入硫酸并浓缩，以雾状喷入流化床干燥机内造粒，并将颗粒干燥至含水率小于3％w/w。

2.权利要求1所述的方法，其由如下步骤组成：

(1)将编码氨基酸序列如SEQ ID No：l所示的蛋白的多核苷酸克隆入pET-20b(+)质粒，然后将该重组质粒导入大肠杆菌菌株W3110(tryA)/pCABD2中，获得产L-赖氨酸的菌株W3110(tryA)/pCABD2-sigma；

(2)在发酵条件下液体培养步骤(1)获得的菌，并收集培养的上清液；

所述发酵条件为：将菌株接入液体LB培养基中振荡培养至OD₅₀₀达到0.35，以5％的接种量接入赖氨酸发酵培养基中以36℃振荡培养72小时，每升赖氨酸发酵培养基配方为：100g葡萄糖，60g (NH₄)₂SO₄，50g CaCO₃，35mL蛋白胨-B，1g KH₂PO₄，400mg MgSO₄·7H₂O，200mg L-甲硫氨酸，10mg FeSO₄·7H₂O，8.1mg MnSO₄·4H₂O，300μg生物素和200μg维生素B1，用Tris-HCl调节至pH 7；

所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸：

赖氨酸51.5~53.5份；

天冬氨酸1.45~1.6份；

苏氨酸0.9~1份；

丝氨酸0.5~0.6份；

谷氨酸2.2~2.6份；

甘氨酸0.85~1份；

丙氨酸1.3~1.5份；

缬氨酸0.85~1份；

甲硫氨酸0.35~0.48份；

异亮氨酸0.55~0.65份；

亮氨酸1.2~1.35份；

酪氨酸0.6~0.75份；

苯丙氨酸0.6~0.7份；

组氨酸0.9~1.05份；和，

精氨酸1~1.2份；

（3）向步骤(2)获得的上清液中加入硫酸并浓缩，以雾状喷入流化床干燥机内造粒，并将颗粒干燥至含水率小于3％w/w。