[发明专利]表没食子儿茶素没食子酸酯在制备抗白癜风药物中的应用

说明书

（一）技术领域

本发明涉及表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechingallate，EGCG）在制备防治白癜风的药物中的应用。

（二）背景技术

白癜风是一种色素缺失性皮肤病，在世界人群中的发病率高达0.5～2%。其临床表现为局部或泛发性皮肤色素脱失。面颈部等暴露部位的白斑给患者造成了毁容性损害，严重的影响患者的身心健康。目前研究认为，该病是一种自身免疫性疾病，CD8+T毒性淋巴细胞对黑素细胞的特异性杀伤是造成表皮黑素细胞缺失的直接原因。它的病因包括遗传和环境等多因素，但到目前为止确切的发病原因还不清楚，且目前对于该病缺乏根治的药物，治疗相当困难。临床上常用的治疗白癜风的外用药物主要包括激素类和一些光敏类药物，但长期使用激素类药物会造成皮肤萎缩，而光敏性药物如补骨脂会导致皮肤起泡等副作用，且疗效有限。

为了克服已有治疗白癜风药物副作用强的缺点，同时提高治疗效果，本发明根据白癜风的发病机制提供一种能有效抑制CD8+T细胞活化增殖从而降低CD8+T细胞对黑素细胞的特异性杀伤达到治疗效果的纯天然新药表没食子儿茶素没食子酸酯。表没食子儿茶素没食子酸酯（结构式见图1）是绿茶中的一种成份，具有抗氧化、抗癌、抗突变等活性，目前还未有表没食子儿茶素没食子酸酯抑制CD8+T细胞活化增殖和治疗白癜风的报道。

（三）发明内容

本发明是提供表没食子儿茶素没食子酸酯的新用途，即表没食子儿茶素没食子酸酯在制备防治白癜风的药物中的应用。

本发明采用的技术方案是：

表没食子儿茶素没食子酸酯在制备防治白癜风的药物中的应用。

具体的，所述表没食子儿茶素没食子酸酯用于制备抑制CD8+T细胞活化增殖的药物。

所述药物可按常规方法，制成下列之一的剂型：擦剂、洗剂、喷剂。

优选的，所述药物中表没食子儿茶素没食子酸酯浓度为2～5%。

目前，对CD8+T细胞特异性杀伤黑素细胞在白癜风发病中的作用已得到学术界的认同，因此具有抑制CD8+T细胞活化增殖，以及抑制CD8+T细胞皮肤归巢的药物将能有效提高治疗白癜风的效果。由于CD8+T细胞在活化初期需要活性氧（ROS）作为信号介质，抑制CD8+T细胞中ROS的产生有可能抑制CD8+T细胞的活化及后续的生物学功能。本发明从表没食子儿茶素没食子酸酯的强抗氧化能力入手，探讨其对CD8+T细胞的免疫抑制作用。

首先建立小鼠CD8+T细胞的体外活化增殖模型，证实表没食子儿茶素没食子酸酯对CD8+T细胞的活化增殖具有显著地抑制作用，且抑制作用与浓度呈正相关，体外达到最大抑制效果的最低药物浓度为10ug/ml。

同时，在小鼠白癜风动物模型上证实表没食子儿茶素没食子酸酯有效抑制CD8+T细胞在莫诺本宗脱色斑周围的聚集，降低莫诺苯宗诱导的白癜风出现的时间，比例和面积，其最小有效作用药物浓度为2%。

本发明的有益效果主要体现在：表没食子儿茶素没食子酸酯为天然从绿茶中的提取物，能大量生产，基本无毒副作用，其能够特异性阻断CD8+T细胞针对自体黑素细胞的免疫损伤，高效地治疗白癜风，为新药筛选提供了基础。

（四）附图说明

图1为表没食子儿茶素没食子酸酯分子结构式；

图2为MTS方法检测小鼠脾脏CD8+T细胞的体外增殖；X坐标为表没食子儿茶素没食子酸酯浓度，Y坐标为CD8+T细胞相对增殖率；

图3为不同条件下莫诺苯宗诱导的小鼠白癜风出现情况；A为单纯用莫诺苯宗处理组，莫诺苯宗涂药处用圆圈标出，非涂药部位白斑用箭头标出；B为莫诺苯宗加表没食子儿茶素没食子酸酯治疗组。

图4为不同条件下莫诺苯宗诱导的小鼠非用药部位脱色斑面积比较；III、IV、V分别为1%、2%和3%没食子儿茶素没食子酸酯治疗组。

图5为不同条件下小鼠莫诺苯宗用药部位周围CD8+T细胞浸润情况比较。

（五）具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

实施例1：

实验动物：

C57BL/6小鼠，雌性，6～8周龄，体质量（20±2）g，购于上海斯莱克实验动物有限公司；

实验药品：

表没食子儿茶素没食子酸酯：美国Sigma公司，用水溶解；

胎牛血清：美国Life Technologies公司；

IL-2：美国Life Technologies公司；