[发明专利]具有内切葡聚糖酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸

权利要求书

1.具有内切葡聚糖酶活性的分离的多肽，其选自下组中的一种或多种：

(a)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:4的成熟多肽具有至少80%同一性，与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少85%同一性，或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少75%同一性；

(b)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在至少高严紧条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、或SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列，(ii)包含于SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列中的cDNA序列，或包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(c)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸与SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列具有至少80%同一性，与SEQ ID NO:5的成熟多肽编码序列具有至少85%同一性，或者与SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列具有至少75%同一性；和

(d)变体，其包含取代、缺失和/或插入一个或几个氨基酸的SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8的成熟多肽。

2.权利要求1的多肽，所述多肽由下述质粒中所含的多核苷酸编码：包含在大肠杆菌NRRL B-30900N中的质粒pPBCel5C，包含在大肠杆菌NRRL B-30902中的质粒pCIC161，包含在大肠杆菌NRRL B-30903中的质粒pCIC453，或者包含在大肠杆菌NRRL B-30904中的质粒pCIC486。

3.权利要求1或2的多肽，其中所述成熟多肽是SEQ ID NO:10的氨基酸25至421，SEQ ID NO:4的氨基酸17至389，SEQ ID NO:6的氨基酸16至397，或SEQ ID NO:8的氨基酸22至429。

4.分离的多核苷酸，其包含编码权利要求1-3中任一项的多肽的核苷酸序列。

5.核酸构建体，其包含权利要求4的多核苷酸，所述多核苷酸与一个或几个调控序列可操作地连接，所述调控序列指导多肽在表达宿主中产生。

6.重组表达载体，其包含权利要求5的核酸构建体。

7.重组宿主细胞，其包含权利要求5的核酸构建体。

8.用于产生权利要求1-3中任一项的多肽的方法，其包括：(a)在有益于所述多肽产生的条件下培养包含核酸构建体的宿主细胞，所述核酸构建体包含编码所述多肽的核苷酸序列；和(b)回收所述多肽。

9.降解或转化含纤维素物质的方法，其包括：用组合物处理含纤维素物质，所述组合物包含有效量的权利要求1-3中任一项的具有内切葡聚糖酶活性的多肽。

10.产生物质的方法，其包括：(a)用组合物糖化含纤维素物质，所述组合物包含有效量的权利要求1-3中任一项的具有内切葡聚糖酶活性的多肽，(b)用一种或多种发酵微生物发酵步骤(a)的糖化的含纤维素物质；和(c)从发酵中回收所述物质。