[发明专利]山核桃叶总黄酮在TBBPA诱导心脏发育毒性的保护作用

说明书

技术领域：

本发明涉及中药有效成分在环境污染物致病方面的新应用，尤其是山核桃叶总黄酮在TBBPA诱导毒害方面的保护作用。

背景研究：

近年来，随着合成材料工业的迅速发展，高分子材料广泛应用于工业、农业、国防等领域，与人们的生活密切相关。高分子材料在给生活带来便利的同时也带来许多安全隐患，比如易燃性，这就迫使人们对各种合成材料提出了阻燃的要求。研究发现，通过添加阻燃剂或者通过化学反应在高分子材料中引入阻燃基团，能有效提高材料的抗燃性。溴代阻燃剂（BFRs）是合成高分子材料的重要助剂之一，其功能是使合成材料具有难燃性、自熄性和消烟性，其工业化生产和应用始于60年代的美国，此后阻燃剂的用量随着社会的现代化发展而持续增长。

四溴双酚A（Tetrabromo-bisphenol A，TBBPA)是目前全球生产量和使用量最大的溴代阻燃剂（BRFs）之一，被广泛应用于印刷线路板、丙烯腈-苯乙烯-丁二烯共聚物（ABS）、耐冲击性聚苯乙烯（HIPS）等多种材料的合成中，以提高阻燃性。全球TBBPA年产量已超过170000吨，其中76%在亚洲，我国年产量约为18000吨，约为全球的1/10左右，近些年，它在各种环境介质如沉积物、土壤、水体、大气及生物体中被检测到，德国河流水体TBBPA浓度范围为0.2-20.4ng/L。湖泊是陆源TBBPA等有机污染物重要的富集库，我国巢湖、青岛和珠江三角洲近岸海域的水体、沉积物和鱼体中也均已检出TBBPA的存在。TBBPA在鱼类体内检出含量可高达245ng/g，巢湖沉积物和水体中浓度为分别为21.96-481.80μg/kg和0-4.77μg/L，为全球已有报道的最高值；最新数据显示，Hongfeng等检测到珠江三角洲表层沉积物中TBBPA含量为干重0.03-31.6ng/g，且结合在沉积物中的TBBPA含量有上升趋势。

就生态毒理效应而言，TBBPA对哺乳动物的免疫毒性、细胞和神经毒性、内分泌干扰效应等研究方面已取得一定进展，但对水生生物毒理学的研究开展较少。TBBPA对鱼类具有强毒性，同时具有高亲脂性、良好热稳定性及一定溶解性，使其容易通过水环境介质沿食物链累积并向上传递，最终对鱼类及人体具有潜在毒害威胁，考虑到我国水体TBBPA环境暴露水平较高的特点，鱼类毒理学的研究日益成为关注的重点。然而，TBBPA对鱼类的毒性仍然数据不足，这也正是欧盟未能同时提供TBBPA生态风险评估报告的重要原因。因此当前迫切需要加强TBBPA对鱼类等水生动物的毒理学研究，以对其生态风险做出准确和全面的评估。

斑马鱼（Danio rerio）是常见的暖水性（21-32℃)观赏鱼，鲤科，由于其常年产卵，鱼卵易收集，而且小规模饲养技术简单，20世纪90年代初开始，被用于有机污染物急、慢性毒性的检测。斑马鱼胚胎发育技术具有材料方便易得、操作简单、可重复性及可靠性较高等优点，而且与传统的鱼类急性毒性实验相比，成本低、影响因素少、灵敏度更高、毒性终点观察项多，并且各个发育阶段可直接在显微镜下观察。近几年，TBBPA对斑马鱼的毒性作用研究逐渐成为一个研究热点，相关毒性机理方面的研究也同时开展，国内有关TBBPA对斑马鱼甲状腺分泌干扰作用，及国外有关TBBPA对斑马鱼胚胎发育性别失调，神经毒性分泌等方向引起极大关注。然而至今，分子和基因水平的毒性机理研究较少。

山核桃（Cathay hickory cathaensis sarg）又名“小核桃”，是一种落叶乔木，是我国特有的名优干果和木本油料作物，约有20个种，是国家3级保护的濒危植物。研究表明，多食干果可以预防心血管疾病的发生。目前国内对山核桃的植物形态分类、栽培、山核桃仁营养价值等的研究较多，但对山核桃的副产品如果壳、叶、外皮等研究报道较少，而到山核桃果仁、外果皮及山核桃叶均具有不同的药用价值。山核桃果仁中富含不饱和脂肪酸和高级醇，具有润肤、降低胆固醇和疏通血管等作用。作为一种健脑益肾的优质保健食品，山核桃果仁还具有滋润、补气、养血、化痰止咳的功效，其果皮具有抑菌、抗癌等功效。在山核桃叶的药用功效研究中发现，核桃叶中含有大量的黄酮类化合物、萜类化合物及胡萝卜素等，其中山核桃叶总黄酮是将山核桃叶进行初步提取分离得到的多种黄酮类物质，山核桃叶总黄酮类化合物的抗氧化作用的研究较多。其中分离所得2’,6’-二羟基-4’-甲氧基查耳酮可抑制平滑肌细胞增殖及迁移引起的血管管腔狭窄，减轻血管炎症反应，对动脉粥样硬化性心脏病等心血管疾病的发生具有防治作用。目前关于山核桃叶的活性成分以及其药理作用报道仍很少，有待于进一步研究。