[发明专利]一种超临界流体萃取罗汉果提取物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物中有效成分的分离纯化方法，特别涉及一种超临界CO₂萃取的罗汉果提取物的方法。

背景技术

罗汉果，被人们誉为“神仙果”，是我国特有的珍贵葫芦科植物，素有良药佳果之称。具有清热润肺、止咳、利咽、滑肠通便的功能，常用于肺火燥咳、咽痛失音、肠燥便秘等症。罗汉果提取物的主要成分为罗汉果甜苷。罗汉果甜苷中的有效成分主要是萜类化合物，包括苷Ⅲ、苷Ⅳ、苷Ⅴ等，其中罗汉果甜苷Ⅴ是其甜味的主要成分，甜度是蔗糖的256~344倍，由于其结合有糖基而易溶于水、乙醇等极性溶剂，难溶于丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂，为白色无定型粉末。有关研究表明，罗汉果甜苷具有很好的保健作用，对促进肠胃机能和清热止咳、滑肠排毒、嫩肤益颜、清热润肺的效果更为显著，可广泛应用于营养保健品、食品、药品等行业中。

目前，关于罗汉果提取物的提取方法主要有：（1）水提树脂分离法；（2）醇提膜分离法（包括超声波或微波辅助提取）；（3）也有人采用加热提取的方法，但是提取过程中温度过高会增加浸出的杂质，提取液的颜色加深，而不利于后续的脱色提纯处理。以上几种方法均存在操作复杂、所得到的提取物色泽深并具有浓烈的中药味和强烈的后苦味、有效成分含量低、能源消耗大、生产成本高的缺点。

发明内容

本发明的目的在于针对现有制备高含量罗汉果甜苷的方法所存在的缺陷，提供一种工艺简单、效率高、能源消耗低、可工业化实现的分离纯化方法。

本发明的技术方案按照下列步骤进行：

1.将罗汉果干果粉碎，加入2~3倍罗汉果重量的30%~50%乙醇水溶液，再加入罗汉果重量2~5‰的糖化酶，搅拌均匀，静置2~3h；

2.将静置后的混合物用超临界CO₂萃取，得到含有罗汉果甜苷的提取液，具体条件为： CO₂流量为5~10L/h，提取压力15~20MPa，温度35~45℃，分离釜中的压力为5~10MPa，温度为40~60℃，提取时间为3~5h；

3.出料，离心除杂，上清液进大孔吸附树脂，水洗吸附树脂至流出液无色，再用树脂重量8~10倍的50%~60%的乙醇溶液洗脱，去除色素和杂质，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，喷雾干燥得白色结晶粉末。

步骤3中所述的大孔吸附树脂型号为ADS-4、ADS-5、ADS-7、ADS-17等。

与现有技术相比，本发明采用超临界CO₂萃取罗汉果中罗汉果甜苷的方法中所用的CO₂纯度大于或等于99%，CO₂为惰性气体，可在常温下操作，能有效地防止热敏性成分和化学不稳定成分的氧化和分解，利用CO₂处于超临界状态下具有的高密度、低粘度和扩散系数大的性质提取罗汉果中的有效成分，然后在用降压升温的方法将溶解于CO₂流体中的溶质分离，起到提取和蒸馏的双重作用。该方法操作周期短、提取率高，同时可避免有机溶剂的残留，另外，由于CO₂廉价易得，一般可回收80% ，节约了能源，同时由于CO₂无燃烧性，使用安全而且对环境无污染。用该方法萃取的罗汉果甜苷，其中罗汉果甜苷Ⅴ的含量达65%以上，萃取效果明显。

具体实施方式

实施例1：将罗汉果干果粉碎，加入2倍罗汉果重量的30%乙醇水溶液，再加入罗汉果重量2‰的糖化酶，搅拌均匀，静置2h；将静置后的混合物用超临界CO₂萃取，得到含有罗汉果甜苷的提取液，具体条件为： CO₂流量为8L/h，提取压力15MPa，温度35℃，分离釜中的压力为8MPa，温度为50℃，提取时间为4h；出料，离心除杂，上清液进ADS-17型大孔吸附树脂，水洗吸附树脂至流出液无色，再用树脂重量8倍的50%的乙醇溶液洗脱，去除色素和杂质，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，喷雾干燥得白色结晶粉末。经HPLC检测，罗汉果甜苷Ⅴ的含量为64.1%。