[发明专利]细胞培养改良

权利要求书

1.包含A部分、B部分和C部分的无血清细胞培养基，其中：

a)A部分基本由排除下列组份的经修饰基础培养基组成：碳酸氢钠、缓冲剂、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、渗透压调节剂、表面活性剂及单糖葡萄糖；

b)B部分基本由无机铁来源组成；及

c)c部分包含重组生长因子；缓冲剂；渗透压调节剂；能量来源；及至少两种不同的非动物源水解产物。

2.一种用于生产蛋白的方法，其包含在权利要求1的细胞培养基中培养哺乳动物细胞。

3.一种无血清细胞培养基，其包含：

a)基础培养基；

b)约8-12ml/kg或116-126mg/L柠檬酸铁；

c)约2-6mg/kg重组人胰岛素；

d)约2-5g/kg无水葡萄糖；

e)约0.1-0.5g/kg L-谷氨酰胺；

f)约1-3g/kg碳酸氢钠；

g)约0.01-0.05g/kg NaH₂PO₄·H₂O；

h)约0.4-0.5g/kg Na₂HPO₄·7H₂O；及

i)约1.0-3.0g/kg酵母源水解产物。

4.一种用于产生蛋白的方法，其包含：

a)在权利要求3的培养基中培养包含编码该蛋白的核酸的哺乳动物细胞；及

b)将(a)的培养物转移至细胞培养生产培养基中，

以生产所述蛋白。

5.一种无血清细胞培养生产培养基，其包含：

a)排除下列组份的经修饰基础培养基：碳酸氢钠、缓冲剂、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、渗透压调节剂、表面活性剂和单糖葡萄糖；

b)约8至12ml/kg或122.45mg/L柠檬酸铁；

c)约4至8mL/kg或10至14mg/kg重组人胰岛素；

d)约5至9g/kg无水葡萄糖；

e)约0.5至0.7g/kg L-谷氨酰胺；

f)约1至2g/kg碳酸氢钠；

g)约1至2g/kg HEPES；

h)约2至3g/kg NaCl；

i)约0.5至2g/kg Pluronic F-68；

j)约0.01至0.1g/kg NaH₂PO₄·H₂O；

k)约0.4至0.5g/kg Na₂HPO₄·7H₂O；

1)约8至12g/kg酵母源水解产物；及

m)约60至70g/kg植物源水解产物。

6.一种无血清细胞培养基，其包含：

a)排除下列组份的经修饰基础培养基：碳酸氢钠、缓冲剂、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、渗透压调节剂、表面活性剂和单糖葡萄糖；

b)约8至12ml/kg或122.45mg/L柠檬酸铁；

c)约3至5mL/kg或6至8mg/kg重组人胰岛素；

d)约5至9g/kg无水葡萄糖；

e)约0.1至2g/kg L-谷氨酰胺；

f)约1至2g/kg碳酸氢钠；

g)约1至2g/kg HEPES；

h)约2至3g/kgNaCl；

i)约0.1至2g/kg Pluronic F-68；

j)约0.01至0.1g/kg NaH₂PO₄·H₂O；

k)约0.4至0.5g/kg Na₂HPO₄·7H₂O；

1)约0.4至0.5g/kg L-天冬酰胺一水合物；

m)约2至6g/kg酵母源水解产物；及

n)约2至4g/kg植物源水解产物。

7.一种用于生产蛋白的方法，其包含在权利要求6的细胞培养基中培养包含编码该抗体的核酸的哺乳动物细胞。