[发明专利]一种本源微生物修复复合制剂及其应用

说明书

技术领域：

本发明涉及一种本源微生物修复复合制剂及其对稠油污染土壤的修复应用，属于微生物修复石油污染土壤技术领域。

背景技术：

随着我国石油工业的迅速发展和对能源的迫切需求，对稠油的开采技术和产量越来越受到重视。目前，在我国已经发现的稠油油田主要分布下面几个油区:辽河油区(主要包括曙光油田、欢喜岭稠油区、和高升油田)，新疆克拉玛依油区(主要分布在九区,六东区,红山嘴油田和凤城稠油区)，胜利油区，河南油区，吐哈油区和大港油区。稠油油区的稠油总产量每年都在大幅度持续增长。但稠油油田在勘探开发过程中的钻井、井下作业和采油等多个环节所产成的废弃泥浆、落地原油、油泥等污染源以及运输和储存过程都会带来井场及其附近土壤土质的恶化，破坏了稠油油区所在地的生态环境。稠油污染土壤还会随雨水、河流进入到地下水或者迁移到动物和植物体内，对生态环境、食品安全和人身健康构成严重威胁。

微生物修复技术是利用自然环境中的土著菌、人为投加的外来菌或基因工程菌的生命代谢作用分解环境中的污染物，从而降低或去除污染物的毒性以达到修复环境的目的。当前用于土壤石油污染治理的方法包括：物理修复法、化学修复法和生物修复法。物理修复法和化学修复法应用成熟，但费用高昂，且使用的化学试剂会产生二次污染；石油污染土壤的微生物修复是生物修复法中非常重要的方法，微生物修复法利用微生物及其他添加剂，将存在于土壤中有毒有害的石油污染物降解为二氧化碳和水或转化为无害物质的系统工程技术，由于微生物修复技术具有费用低、处理效果好、对环境影响低、无二次污染、不破坏植物生长所需要的土壤环境等优点。

发明内容：

本发明目的是提供一种本源微生物修复复合制剂及其用于稠油污染土壤的修复。

本发明所述的本源微生物修复复合制剂由以下四种组分组成：从稠油污染土壤中分离出的高效降解菌、降解菌的营养物质、复合表面活性剂渗透剂、氧化促进活化剂。这四种组分可以单独保存。

本发明提供的高效降解菌是乳杆菌5#（Lactobacillus sp.）和芽孢杆菌1#（Bacillus sp.）都保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号分别为CGMCC No.7637和CGMCC No.7636。

本发明是通过如下技术方案实现上述目的。

1.从稠油污染土壤中分离降解菌：

(1)制备微生物培养基

无机盐液体培养基的组成:在1000ml蒸馏水中加入NaCl10.00g，NH₄Cl0.50g，K₂HPO₄1.00g，MgSO₄0.50g，CaCl₂0.20g，KCl0.10g，FeSO₄·7H₂O0.02g；

胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA)液体培养基组成：在1000ml蒸馏水中加入酪蛋白17.00g，蛋白胨3.00g，葡萄糖2.50g，NaCl5.00g，K₂HPO₄2.50g；

(2)优势菌的富集分离和筛选

从油污土壤中富集降解菌采用TSA液体培养基，使其能够迅速生长，第二次及第三次富集培养采用无机盐液体培养基，加入1%稠油；分离培养基为无机盐液体培养基加入2%的琼脂，加入1%稠油；筛选降解采用无机盐液体培养基加入0.5%的稠油；菌种纯化保存培养基为TSA液体培养基加入2%的琼脂，斜面划线后于冰箱内保存。

2.微生物降解菌的营养物质筛选

所述的营养物质由（NH₄）₂SO₄，KNO₃和KH₂PO₄构成。

本产品中微生物降解菌的N源营养物质是由KNO₃和（NH₄）₂SO₄构成，P源营养物质由KH₂PO₄构成。

3.油污土壤氧化促进活化剂

稠油污染土壤中含有大量重质成分和部分胶质、沥青。双氧水（H₂O₂）在降解初期可直接氧化土壤中重质成分和部分胶质、沥青，并能及时补充土壤中氧的消耗，作为微生物降解的电子受体。本产品中的氧化促进活化剂采用双氧水(H₂O₂)（98%含量的工业化产品）。