[发明专利]一种检测女性生殖道分泌物淋球菌的方法及所用的反应垫

说明书

技术领域

    本发明涉及一种检测女性生殖道分泌物淋球菌的方法及所用的反应垫，属于生物化学检测技术领域。 

背景技术

生殖道感染是严重威胁女性身心健康的疾病，当女性机体免疫功能下降，内分泌功能紊乱，阴道的自然防御系统遭到破坏，阴道内微生态的有益菌减少，病原菌入侵导致感染性疾病的发生。在世界范围内,特别是发展中国家妇女患生殖道疾病的比例日益增大，常见的生殖道感染疾病有细菌性阴道炎（阴道加德纳菌、类杆菌等厌氧菌侵入）、霉菌性阴道炎（白色念珠菌侵入）、滴虫性阴道炎（阴道毛滴虫侵入）及淋病等。

对于生殖道疾病的治疗关键在于准确确定生殖道感染的病原体，因此生殖道分泌物检测被作为女性生殖健康检查的重要检测项目。目前，淋球菌检测则利用淋球菌特异性酶系统在试管内产生气泡的多少判断阴阳性，由于女性生殖道分泌物中杂菌较多，利用“气泡法”存在非特异性，干扰试剂检测，所以本法不适宜于女性生殖道分泌物的检测。淋球菌的另一种鉴别试验就是氧化酶试验。原理是淋球菌具有氧化酶，它产生的氧离子能将氧化酶试剂（盐酸四甲基对苯二胺或盐酸二甲基对苯二胺）氧化成醌类化合物，出现颜色反应。但是由于盐酸四甲基对苯二胺试剂能很快自身氧化，并失去敏感性，所以目前方法针对氧化酶检测不够稳定，导致灵敏度不高，给储存和工作带来不便，不适用于临床筛检。

发明内容

本发明的其中一个目的是：提供一种检测女性生殖道分泌物淋球菌所用的反应垫，采用该反应垫进行检测女性生殖道淋球菌具备稳定性好，灵敏度高，方便快捷，且没有环境污染的优点。 

本发明采用如下技术方案：

一种用于检测女性生殖道淋球菌的反应垫，其特别之处在于：携带有氧化酶试剂和辅助试剂；

所述氧化酶试剂为0.1-2mg/ml抗坏血酸和10-12mg/ml的盐酸四甲基对苯二胺的按照1:500的体积比的混合液；

所述辅助试剂为浓度为0.1-1mg/mL的五水硫酸铜溶液；

所述氧化酶试剂与辅助试剂的体积比为1:1。

所述抗坏血酸的优选浓度为1mg/ml；

所述盐酸四甲基对苯二胺的优选浓度为10mg/ml；

所述五水硫酸铜溶液的优选浓度为0.5 mg/ml。

所述反应垫，一个反应垫所携带所氧化酶试剂的含量为1ul，辅助试剂的含量为1ul。

所述反应垫，优选采用下述方式制备而成：

将氧化酶试剂滴于空白反应垫，用流动空气干燥4小时以上，再加辅助试剂于反应垫，用流动空气干燥2小时以上。

本发明还提供了采用上述反应垫检测女性生殖道分泌物淋球菌的方法。

一种采用上述反应垫检测女性生殖道分泌物淋球菌的方法，包括下述步骤：

将采集阴道分泌物的棉拭子置于样品管中，用30μl预处理液充分涮洗后轻轻捏压试管壁，将拭子吸附的液体挤出，弃拭子，得样品液；所述预处理液为pH4.4-4.6的生理盐水；

向反应垫上加30μl样品液，然后置于37℃温浴15min，2min内判读结果。

判断标准为不显色（标记为“—”，提示正常）；显淡红色表示弱阳性（标记为“+”，提示正常）；显红色或红紫色表示阳性（标记为“+”，提示可能淋球菌感染）。

有益效果

本发明与现有检测方法相比，在氧化酶底物中加入了一定浓度的抗坏血酸,增强了盐酸四甲基对苯二胺的稳定性，使其自身不易被氧化，便于储存；辅助试剂五水硫酸铜，作为显色液作用于底物与样本之间，使得检测方法更加灵敏，便于临床快速筛查。

具体实施方式

用棉拭子采集相同的生殖道分泌物测试样本；取一支真空包装的样品管，分别加入样本处理液300μl；将采集阴道分泌物的棉拭子置于样品管中，用pH4.5的生理盐水溶液充分涮洗后轻轻捏压试管壁，将拭子吸附的液体尽量挤出，弃拭子，得样品液。

配浓度为0.1mg/mL的五水硫酸铜溶液作为辅助试剂A;

配浓度为1mg/mL的五水硫酸铜溶液作为辅助试剂B;

配浓度为0.5mg/mL的五水硫酸铜溶液作为辅助试剂C;

用0.1mg/ml抗坏血酸和浓度为10mg/ml的盐酸四甲基对苯二胺按照体积比为1：500混合得氧化酶试剂A；

用2mg/ml抗坏血酸和浓度为10mg/ml的盐酸四甲基对苯二胺按照体积比为1：500混合得氧化酶试剂B；

用0.1mg/ml抗坏血酸和浓度为12mg/ml的盐酸四甲基对苯二胺按照体积比为1：500混合得氧化酶试剂C。