[发明专利]一种地胆草丁的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种地胆草丁的制备方法。

背景技术

地胆草丁，CAS号21899-50-3，分子式C20H22O7，分子量374.38,分子结构式如下：

地胆草丁具有抗肿瘤作用，对人体鼻咽癌细胞有细胞毒活性，对淋巴细胞白血病也有抑制作用。

通过文献检索，未见有地胆草丁的工业化制备方法披露。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种地胆草丁的工业化制备方法。

     为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种地胆草丁的制备方法，其特征在于：取高地胆草干燥后粉碎，加入5-10倍量50-99%乙醇溶液，回流提取2-3次，提取液缩至无醇加入大孔树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，洗脱液回收试剂，浓缩液加入等体积乙酸乙酯分搅拌，收集乙酸乙酯层溶液，加入氧化铝短柱中，收集下柱液，浓缩至小体积加入适量石油醚，冷藏结晶，结晶物滤出再用无水乙醇重结晶即得。

    所述的大孔树脂为非极性大孔树脂或弱极性大孔树脂，型号可选D101、AB-8、HPD100和HZ816中的一种。

    所述的乙醇溶液梯度洗为：先用5-10倍柱体积20-40%乙醇溶液洗脱杂质，再用5-10倍柱体积50-70%乙醇溶液洗脱有效成分。

    所述的氧化铝为中性氧化铝。

采用本法制备地胆草丁，工艺简便易操作，产品纯度高，易于实现工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

    高地胆草干燥后粉碎，称量10kg加入8倍量70%乙醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇加适量水稀释后加入D101大孔树脂中吸附，先用7倍柱体积20%乙醇溶液洗脱杂质，再用5倍柱体积60%乙醇溶液洗脱有效成分，洗脱液浓缩至无醇加入等体积乙酸乙酯分搅拌，收集乙酸乙酯层溶液，加入中性氧化铝短柱中，收集下柱液，浓缩至300ml加入50ml石油醚，冷藏结晶，结晶物滤出再用无水乙醇重结晶，得地胆草丁13g，经HPLC检测，含量98.3%。

实施例2：

    高地胆草干燥后粉碎，称量10kg加入10倍量50%乙醇溶液，回流提取2次，提取液缩至无醇加适量水稀释后加入AB-8大孔树脂中吸附，先用5倍柱体积30%乙醇溶液洗脱杂质，再用8倍柱体积70%乙醇溶液洗脱有效成分，洗脱液浓缩至无醇加入等体积乙酸乙酯分搅拌，收集乙酸乙酯层溶液，加入中性氧化铝短柱中，收集下柱液，浓缩至200ml加入40ml石油醚，冷藏结晶，结晶物滤出再用无水乙醇重结晶，得地胆草丁16g，经HPLC检测，含量98.1%。

实施例3：

   高地胆草干燥后粉碎，称量10kg加入7倍量60%乙醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇加适量水稀释后加入HPD100大孔树脂中吸附，先用5倍柱体积40%乙醇溶液洗脱杂质，再用10倍柱体积50%乙醇溶液洗脱有效成分，洗脱液浓缩至无醇加入等体积乙酸乙酯分搅拌，收集乙酸乙酯层溶液，加入中性氧化铝短柱中，收集下柱液，浓缩至400ml加入100ml石油醚，冷藏结晶，结晶物滤出再用无水乙醇重结晶，得地胆草丁17g，经HPLC检测，含量97.4%。

实施例4：

   高地胆草干燥后粉碎，称量10kg加入6倍量70%乙醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇加适量水稀释后加入HZ816大孔树脂中吸附，先用6倍柱体积30%乙醇溶液洗脱杂质，再用6倍柱体积65%乙醇溶液洗脱有效成分，洗脱液浓缩至无醇加入等体积乙酸乙酯分搅拌，收集乙酸乙酯层溶液，加入中性氧化铝短柱中，收集下柱液，浓缩至400ml加入80ml石油醚，冷藏结晶，结晶物滤出再用无水乙醇重结晶，得地胆草丁15g，经HPLC检测，含量97.7%。