[发明专利]一种卵形山杜英叶中提取杜英素的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种卵形山杜英叶中提取杜英素的方法。

背景技术

杜英素，CAS号102382-31-0，分子式C47H34O32，分子量1110.76,分子结构式如下：

杜英素为鞣质类物质，无定型粉末，具有引湿性，具有细胞毒活性和抗HIV活性。

通过文献检索，现有制备杜英素的方法多采用树脂柱法，如“一种杜英素的制备方法”该专利采用大孔树脂和活性炭柱。树脂柱法洗脱溶剂用量大，产生废液较多，污染严重，而生产周期较长。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种卵形山杜英叶中提取杜英素的高效方法。

     为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种从卵形山杜英叶中提取杜英素的方法，其特征在于：取卵形山杜英叶粉碎，加入适量水和生物酶酶解5-10小时，再加入5-10倍量80-99%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液减压回收乙醇，浓缩加适量水稀释，过滤后加入超滤膜超滤，滤液再经过纳滤膜浓缩，收集浓缩液，加入适量明胶溶液充分沉淀，离心沉淀物用丙酮溶液溶解，收集丙酮溶液回收试剂，真空干燥即得。

    所述的生物酶为纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种。

    所述的超滤膜为截留分子量3000-10000的中空纤维素超滤膜，纳滤膜为截留分子量300-1000的纳滤膜 。

采用本法生产杜英素，工艺简便易操作，提取效率高，污染小，能耗低，所得产品纯度高，易于实现工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

   取卵形山杜英叶粉碎，称取5kg，加入5L水和5g纤维酶，在温度50℃条件下酶解5小时，然后加入7倍量90%乙醇溶液回流提取3次，提取液减压回收乙醇，浓缩加适量水稀释，过滤后加入截留分子量3000的中空纤维素超滤膜超滤，滤液再经过截留分子量800的中空纤维素纳滤膜浓缩，收集浓缩液，加入适量明胶溶液充分沉淀，离心沉淀物用丙酮溶液回流溶解，滤过，回收丙酮溶液，真空干燥得类白色杜英素70g，含量98.5%。 

实施例2：

   取卵形山杜英叶粉碎，称取5kg，加入5L水和5g淀粉酶，在温度40℃条件下酶解7小时，然后加入5倍量80%乙醇溶液回流提取3次，提取液减压回收乙醇，浓缩加适量水稀释，过滤后加入截留分子量6000的中空纤维素超滤膜超滤，滤液再经过截留分子量1000的中空纤维素纳滤膜浓缩，收集浓缩液，加入适量明胶溶液充分沉淀，离心沉淀物用丙酮溶液回流溶解，滤过，回收丙酮溶液，真空干燥得类白色杜英素65g，含量97.3%。 

实施例3：

  取卵形山杜英叶粉碎，称取5kg，加入5L水和10g果胶酶，在温度45℃条件下酶解5小时，然后加10倍量99%乙醇溶液回流提取2次，提取液减压回收乙醇，浓缩加适量水稀释，过滤后加入截留分子量10000的中空纤维素超滤膜超滤，滤液再经过截留分子量1000的中空纤维素纳滤膜浓缩，收集浓缩液，加入适量明胶溶液充分沉淀，离心沉淀物用丙酮溶液回流溶解，滤过，回收丙酮溶液，真空干燥得类白色杜英素76g，含量97.8%。