[发明专利]一种钩吻的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。

背景技术

钩吻，又名大茶药、断肠草等，钩吻是马钱子科植物胡蔓藤，多年生常绿藤本植物。主要分布在广西、云南、贵州、湖南、福建、江西及浙江等地；性温，味苦、辛；有大毒。外用具有祛风散疾、消肿止痛、攻毒杀虫的功能，主治疥傲、湿疹、疲疲、痈肿、疗疮、体癣、跌打损伤、风湿痹痛、神经痛，抑制肿瘤细胞生长、局部用于扩陇、免疫调节等方面。中国钩吻已分离出17种单体，其中以钩吻素己毒性最强。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种钩吻的快速繁殖方法，由该方法所制备得到的钩吻组培幼苗生长周期短，成活率高，可控性好，可以规模化的进行生产。

本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：

选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75％酒精处理30秒，0.1％的升汞消毒12分钟，无菌水冲洗 4-5 次，接种在B₅+PP333 0.5mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入 增殖培养基B₅+IBA1mg/L+赤霉素0.6mg/L上进行增殖培养，培养条件为光照2000lx，光期12h，暗期12h，温度25℃，湿度50%～60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.2~1 mg/L中诱导生根，培养条件为光照4000lx，光期14h，暗期10h，温度27℃，湿度50%～60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产。

采用本发明培养出来的试管苗长势好，生长速度快，成活率达95%，周期短，操作可控，可进行工业扩大化生产。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用 75％酒精处理30秒，0.1％的升汞消毒 12分钟，无菌水冲洗 4-5 次，接种在 B₅+PP333 0.3mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B₅+IBA0.5mg/L+赤霉素1mg/L上进行增殖培养，培养条件为光照2000lx，光期12h，暗期12h，温度25℃，湿度50%～60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根，培养条件为光照4000lx，光期14h，暗期10h，温度27℃，湿度50%～60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达80%。

实施例2

选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用75％酒精处理30秒，0.1％的升汞消毒 12分钟，无菌水冲洗 4-5 次，接种在 B₅+PP333 1mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B₅+IBA1.5mg/L+赤霉素1mg/L上进行增殖培养，培养条件为光照2000lx，光期12h，暗期12h，温度25℃，湿度50%～60%，30天后转入生根培养基MS+NAA1 mg/L中诱导生根，培养条件为光照4000lx，光期14h，暗期10h，温度27℃，湿度50%～60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达85%。

实施例3

选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用 75％酒精处理30秒，0.1％的升汞消毒 12分钟，无菌水冲洗 4-5 次，接种在 B₅+PP333 0.5mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B₅+IBA1.5mg/L+赤霉素1mg/L上进行增殖培养，培养条件为光照2000lx，光期12h，暗期12h，温度25℃，湿度50%～60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.2 mg/L中诱导生根，培养条件为光照4000lx，光期14h，暗期10h，温度27℃，湿度50%～60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达90%。

实施例4

选用钩吻生长健壮的茎段，用洗衣粉浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净工作台上用 75％酒精处理30秒，0.1％的升汞消毒 12分钟，无菌水冲洗 4-5 次，接种在 B₅+PP333 1mg/L腋芽诱导培养基上，将诱导出来的腋芽接入增殖培养基B₅+IBA0.5mg/L+ 赤霉素1mg/L上进行增殖培养，培养条件为光照2000lx，光期12h，暗期12h，温度25℃，湿度50%～60%，30天后转入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根，培养条件为光照4000lx，光期14h，暗期10h，温度27℃，湿度50%～60%，试管苗生根后长约5cm进行炼苗移栽，大田大规模生产，成活率达92%。