[发明专利]与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记及其获取方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及小麦分子生物技术与育种应用领域，具体地说是一种与增加小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记及其获取方法和应用。

背景技术

小麦是世界上最主要的粮食作物之一，也是我国第二大粮食作物，其高产、稳产直接影响到我国人们生活水平和国家粮食安全。提高小麦单产、培育高产新品种是确保我国小麦总产水平、保障粮食安全的根本出路。小麦产量性状是复杂的数量性状，受多个数量性状基因位点（Quantitative trait locus，QTL）控制，具有遗传力低、受环境影响大、选择难度高的特性，所以在选育高产小麦品种时，传统的育种方法常存在时间长、耗费大、成本高、成果小的问题。分子标记辅助育种是一种采用与特定性状相关联的分子标记作为辅助手段进行育种的有效方法，具有不受环境条件限制、在植物发育的各个组织和生育时期均可检测、选择效率高的优势。

穗数、穗粒数和千粒重是小麦产量构成的三要素。数十年来，在提高小麦产量方面，通过增加穗数和千粒重来提高小麦产量已经取得较大进展，目前较难取得进一步突破；而通过增加穗粒数仍能继续提高产量潜力（何中虎等，作物学报，2011，37：202-215）。小穗数是穗粒数的重要构成因素，提高小穗数可以有效增加穗粒数进而提高小麦产量。因此，研究小穗数基因，通过分子标记技术，提高小麦穗粒数获得高产小麦新品种，在育种工作中具有极其重要的意义。

发明内容

本发明的目的就是提供一种与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记及其获取方法和应用，通过发明获得的与小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记，来检测小麦品种或品系中是否具有增加小穗数的基因位点，以加快小麦高产品种的选育进程。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明所提供的一种与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记，该分子标记为Xbarc192和Xbarc253，其所述分子标记Xbarc192的左端引物序列如SEQ ID NO:1所述、右端引物序列如SEQ ID NO:2所述；所述分子标记Xbarc253的左端引物序列如SEQ ID NO:3所述、右端引物序列如SEQ ID NO:4所述。

一种与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记的获取方法，它包括以下步骤：采用分子标记Xbarc192的引物，

左端引物序列  GCGAATAGCACTATGGTAAACATTGAGGTAC（如SEQ ID NO:1所述）、

右端引物序列  GCGGGTTCAATTATCAAAAGGCACAG（如SEQ ID NO:2所述）

和分子标记Xbarc253的引物，

左端引物序列  GGGAAGACACGACACGACTC（如SEQ ID NO:3所述）、

右端引物序列  TCGTAAGATTACCTCGGATGAAGAA（如SEQ ID NO:4所述）

对小麦品种京411的DNA分别进行PCR扩增，其PCR扩增体系为20 μl，包括：左、右端引物（10 μmol/L）各1.0 μl，10×Buffer 2.0 μl，Mg²⁺（25 mmol/L） 1.2 μl，Taq酶（5 U/μl）0.2 μl，dNTP（2.5 mmol/L）0.6 μl，DNA（30 ng/μl）2.0 μl，其余用ddH₂O补足；PCR扩增程序为：94℃预变性7 min；94℃变性30 s，50℃退火45 s，72℃延伸60 s，34个循环；72℃后延伸7 min；最后10℃终止反应；扩增产物分别在8%聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离后，获得的扩增产物的分子量分别为200 bp和186 bp，即得到与小麦小穗数主效基因位点QTss.cas-7A紧密连锁的分子标记。

本发明所述的与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记在选育高产小麦中的应用，即为将与小麦小穗数主效基因位点紧密连锁的分子标记用于检测小麦品种或品系的方法，该方法它包括以下步骤：