[发明专利]利用大孢子培养技术培育黄瓜育种材料的方法有效
申请号: | 201310428574.4 | 申请日: | 2013-09-18 |
公开(公告)号: | CN103461132A | 公开(公告)日: | 2013-12-25 |
发明(设计)人: | 刘立功;张峰;于拴仓;赵泓;王晶;李军;乔雪辉;崔瑾 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100097 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 大孢子 培养 技术 培育 黄瓜 育种 材料 方法 | ||
1.利用大孢子培养技术培育黄瓜育种材料的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)取黄瓜植株开花前未授粉的子房,消毒后用无菌水洗净;
2)将子房切片,接种于MS固体培养基I中,置于33-36℃黑暗条件下高温诱导24-72h;
3)将上述培养基置于16h光照,8h黑暗的室温条件下继续培养至出现胚状体和愈伤组织;
4)将胚状体转移至MS固体培养基II中,置于16h光照,8h黑暗的室温条件下培养,待胚状体长出5-6片叶后,炼苗,定植于大田;
其中,步骤2)中所述MS固体培养基I为:MS+3%蔗糖+6-苄基腺嘌呤1mg/L+萘乙酸0.5mg/L,pH值5.8-6.0;
步骤4)中所述MS固体培养基II为:MS+3%蔗糖+6-苄基腺嘌呤0.5mg/L+萘乙酸0.2mg/L,pH值5.8-6.0。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)具体为:取黄瓜植株开花前2天未授粉的子房,用75%的酒精消毒30s,然后用0.1%的HgCL2溶液消毒7min,最后用无菌水冲洗3次。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中是将子房横切成2mm厚的子房切片。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)中使用的光源为光强1500Lux的LED灯光源。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)中使用的光源为光强2000Lux的LED灯光源。
6.用于诱导培养黄瓜大孢子单倍体的培养基,其特征在于,所述培养基为:MS+3%蔗糖+6-苄基腺嘌呤1mg/L+萘乙酸0.5mg/L,pH值5.8-6.0。
7.用于继代培养黄瓜大孢子单倍体的培养基,其特征在于,所述培养基为:MS+3%蔗糖+6-苄基腺嘌呤0.5mg/L+萘乙酸0.2mg/L,pH值5.8-6.0。
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