[发明专利]一种疫苗组合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种疫苗组合物，所述疫苗组合物包括免疫量的水貂病毒性肠炎抗原以及兽医学上可接受的水性佐剂。

2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述水貂病毒性肠炎抗原为灭活形式、改良的活的形式或减毒形式的水貂病毒性肠炎抗原。

3.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，所述水貂病毒性肠炎抗原为灭活的MEV-RC1株、MEV-DL1株、MEV-ZYL-1株、MEV-Z6株、MWV-ZJ1株中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述水性佐剂为脂质A的水性免疫佐剂组合物、Gel佐剂、ESSAL IMP佐剂中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其中，所述的脂质A的水性免疫佐剂组合物为含有脂质A衍生物和表面活性剂；优选地，所述的脂质A的水性免疫佐剂组合物为减毒的脂质A衍生物和表面活性剂；更优选地，所述脂质A衍生物包括单磷酰基脂质A和3-O-脱酰基的单磷酰基脂质A，所述表面活性剂为吐温80。

6.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述水性佐剂在所述水貂病毒性肠炎疫苗组合物的含量为2%-50%（V/V）；优选地，所述水性佐剂在所述水貂病毒性肠炎疫苗组合物的含量为15%-20%（V/V）。

7.一种所述疫苗组合物的制备方法，所述制备方法包括：

（1）将水貂肠炎病毒接种于单层培养细胞中，待培养至所述培养细胞感染、脱落时，收获细胞及其上清液，反复冻融后收获得水貂肠炎病毒液；

（2）灭活所述水貂肠炎病毒液；

（3）在灭活后的水貂病毒液中加入佐剂，乳化。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述步骤（1）中水貂肠炎病毒为MEV-RC1株、MEV-DL1株、MEV-ZYL-1株、MEV-Z6株、MWV-ZJ1株中的一种或几种，所述培养细胞为单层F81猫肾细胞；培养所述细胞的培养液为EMEM细胞维持液；所述的水貂肠炎病毒与EMEM细胞维持液的接种比例为10%（V/V）；所述步骤（1）中所述的培养细胞脱落至20%-30%单层细胞收获细胞及其上清液。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述步骤（2）中所述的灭活剂为β-丙内酯，所述灭活剂的终浓度为1:4000（V/V）；所述步骤（3）中所述的佐剂为脂质A的水性免疫佐剂组合物、Gel佐剂、ESSAL IMP佐剂中的一种或几种。

10.根据权利要求1～6中任一项所述疫苗组合物在制备预防和治疗水貂病毒性肠炎的药物中的应用。