[发明专利]一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法

权利要求书

1.一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，利用高压脉冲电场技术耦合酶制剂降解人参皂甙Rb1制备稀有人参皂甙Rd，其特征在于：

在常温下将人参皂甙Rb1样品溶解于缓冲溶液中，加入酶制剂混合均匀，直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为5-20kV/cm，处理的脉冲数为1-10个，将高压脉冲电场处理后的物料加入有机溶剂萃取，离心分离，取上清液，挥发除掉溶剂，即获得人参皂甙Rd。

2.根据权利要求1所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

所述的酶制剂为纤维素酶或β-葡萄糖苷酶，添加量为1-4%。

3.根据权利要求1所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

所述缓冲溶液使用醋酸钠-醋酸缓冲液。

4.根据权利要求1所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

所述有机溶剂使用正丁醇时用水饱和溶液。

5.根据权利要求1至4任一项所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

在1mM人参皂甙Rb1溶液中加入3%β-葡萄糖苷酶，混合均匀，在常温下直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为15kV/cm，脉冲数为8；用水饱和正丁醇萃取反应液，离心分离，上清液挥发除去溶剂，人参皂甙Rd的得率为91.42%。

6.根据权利要求1至4任一项所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

在1mM人参皂甙Rb1溶液中加入3%β-葡萄糖苷酶，混合均匀，在常温下直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为10kV/cm，脉冲数为10；用水饱和正丁醇萃取反应液，离心分离，上清液挥发除去溶剂，人参皂甙Rd的得率为70.35%。

7.根据权利要求1至4任一项所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

在1mM人参皂甙Rb1溶液中加入3%β-葡萄糖苷酶，混合均匀，在常温下直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为20kV/cm，脉冲数为6；用水饱和正丁醇萃取反应液，离心分离，上清液挥发除去溶剂，人参皂甙Rd的得率为44.52%。

8.根据权利要求1至4任一项所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

在1mM人参皂甙Rb1溶液中加入4%β-葡萄糖苷酶，混合均匀，在常温下直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为20kV/cm，脉冲数为8；用水饱和正丁醇萃取反应液，离心分离，上清液挥发除去溶剂，人参皂甙Rd的得率为56.29%。

9.根据权利要求1至4任一项所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

在1mM人参皂甙Rb1溶液中加入2%纤维素酶Cellulase1.5L FG，混合均匀，在常温下直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为15kV/cm，脉冲数为10；用水饱和正丁醇萃取反应液，离心分离，上清液挥发除去溶剂，人参皂甙Rd的得率为51.06%。

10.根据权利要求1至4任一项所述的一种快速制备稀有人参皂甙Rd的方法，其特征在于：

在1mM人参皂甙Rb1溶液中加入2%纤维素酶Cellulase，Aspergillus niger，混合均匀，在常温下直接通入高压脉冲电场进行处理，其电场强度为15kV/cm，脉冲数为10；用水饱和正丁醇萃取反应液，离心分离，上清液挥发除去溶剂，人参皂甙Rd的得率为46.81%。