[发明专利]一种五味子中木脂素单体的提取分离制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，涉及一种快速高效的联合制备方法从五味子中提取、分离纯化木脂素单体成分。具体涉及用超临界提取法结合高速逆流色谱法提取分离制备五味子中的单体成分。

背景技术

五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill或华中五味子Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.的成熟果实。前者习称“北五味子”，后者习称“南五味子”。始载于《神农本草经》，列为上品。五味子性温，味甘、酸，归肺、心、肾经。具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的功效。可用于治疗久咳虚喘、自汗盗汗、久泻不止、津伤口渴、心悸、失眠多梦等。现代药理学研究表明五味子具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、保肝、神经保护等多种药理作用。

五味子中含有木脂素、挥发油、有机酸、多糖、三萜及倍半萜等多种化学成分，其中木脂素为主要有效成分。木脂素类成分中含量较高的包括五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素等。随着研究的深入，以上几种主要的木脂素类成分均被证实具有良好的药理活性，如五味子醇甲具有抗氧化、抗衰老、保肝等药理作用，五味子甲素具有保肝等药理活性，五味子乙素具有护肝、抗癌、抗病毒、抗溃疡、抗氧化、神经保护等作用，因此，开发一种快速、高效、低成本的制备方法对该类成分的进一步研究开发来说至关重要。

通过长期研究，对五味子中总木脂素类成分的提取工艺已较为成熟，但对木脂素单体类成分的制备大多集中在五味子醇甲、五味子醇乙的分离纯化上，而对五味子甲素、五味子乙素、五味子酯乙等单体的分离纯化报道较少。文献中有以溶剂提取法、超声提取法、微波提取法、超临界流体萃取法、酶解法辅助超声波提取法、超高压提取法等方法对五味子中木脂素类成分进行提取，以硅胶柱色谱法、大孔树脂柱色谱法、高速逆流色谱法对木脂素单体进行分离的。大多提取分离的流程是以回流法提取，采用一定的方法对木脂素进行富集除杂，进而再以柱色谱对其进行分离纯化。如申请号为201210144871.1的发明专利公开了“一种纯化五味子醇甲的新方法”。采用微波逆流提取、大孔树脂分离纯化和柱层析进一步纯化，最终得到了五味子醇甲单体（含量98％以上）。如申请号为200910010631.0的发明专利中公开了“一种制备五味子醇甲和五味子醇乙的新工艺”，提取工艺为将含有五味子醇甲和五味子醇乙的提取液用有机溶剂萃取，萃取物经过反复柱层析分离后，收集含有五味子醇甲和五味子醇乙的流份，得到纯度均大于98%五味子醇甲和五味子醇乙。再如申请号为201010510828.3的发明专利中公开了“一种从五味子中提取五味子甲素的工艺”，使用超声辅助石油醚提取和碱醇反萃取的方法制备木脂素总提物，再两次通过硅胶氧化铝混合柱层析，洗脱，回收溶剂，石油醚-丙酮或环己烷-乙醇重结晶，干燥，最终获得五味子甲素单体。

不难看出，五味子中木脂素单体的提取分离纯化工艺存在步骤繁琐，制备周期长，操作复杂，耗时耗力，得率低等各种弊端。专利号为ZL200910242188.X的发明专利中公开了一种“五味子单体成分的分离制备方法”，该专利较之前方法，纯化步骤采用高速逆流色谱，使得纯化周期得到了缩短，可同时制备多个木脂素单体。但样品前处理繁琐，需通过提取、萃取、硅胶柱层析等多步，使得整个制备过程仍较复杂。

超临界流体萃取作为一种环保、快速、且可工业化的提取手段，目前正广泛用于各种天然产物的提取中。五味子中的木脂素类成分极性较小，用该方法对其进行提取具有其他方法不可比拟的优势。如专利号为ZL200610041566.4、ZL201010119871.7的发明专利中均采用了超临界流体萃取法提取五味子中的总木脂素类成分。但至今未有将超临界提取与高速逆流色谱分离纯化五味子中木脂素单体的报道。

发明内容

本发明针对现有工艺中的不足，提供一种从五味子药材中提取、分离纯化五味子甲素、五味子乙素、五味子酯乙、五味子醇甲、五味子醇乙的方法，该方法工艺简便，效率高，快速，产品纯度大于85％。

本发明公开了一种以超临界流体萃取五味子药材粉末，所得超临界萃取物以高速逆流色谱进行分离纯化，最终可同时获得纯度高于85%的五味子甲素、五味子乙素、五味子酯乙、五味子醇甲、五味子醇乙单体木脂素成分。整个提取分离过程最快可在十几个小时内完成。这种方法较传统的提取分离纯化方法更为快速、简便、高效。

本发明采用的技术方案是：