[发明专利]基于纳米金形成的可视化检测过氧化氢酶的方法有效
申请号: | 201310430745.7 | 申请日: | 2013-09-18 |
公开(公告)号: | CN103472055A | 公开(公告)日: | 2013-12-25 |
发明(设计)人: | 彭池方;段小慧;刘丽强;宋珊珊 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/31 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王锋 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 纳米 形成 可视化 检测 过氧化氢酶 方法 | ||
1.一种基于纳米金形成的可视化检测过氧化氢酶的方法,其特征在于,包括:将可能含有过氧化氢酶的测试样品与过氧化氢、辅助催化剂和氯金酸在满足选定液相环境中混合反应,通过观测混合反应体系的颜色和/或可见光吸收强度,实现对样品中所含过氧化氢酶的检测,
其中,所述选定液相环境为适于过氧化氢酶催化降解过氧化氢的液相反应环境。
2.根据权利要求1所述的基于纳米金形成的可视化检测过氧化氢酶的方法,其特征在于,所述辅助催化剂包括柠檬酸钠、抗坏血酸或没食子酸。
3.根据权利要求1所述的基于纳米金形成的可视化检测过氧化氢酶的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提供浓度为800μM的过氧化氢溶液,且所述过氧化氢溶液还含有浓度为0.5 ~ 2mM 的2-吗啉乙磺酸, pH值5.0~7.0;
(2)取可能含有过氧化氢酶的测试样品与步骤(1)中所述的过氧化氢溶液按照1:1的体积比混合均匀,并在室温下静置10min以上;
(3)提供浓度为5~ 10 mM的氯金酸溶液、浓度为1.0 mM的辅助催化剂溶液和浓度为0.5 ~ 2mM 的MES溶液按照3~ 6:3:91的体积比混合;
(4)取步骤(2)所得混合溶液与步骤(3)所得混合溶液均匀混合反应5 min以上,观测混合反应体系的颜色和/或可见光吸收强度,实现对样品中所含过氧化氢酶的检测。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的基于纳米金形成的可视化检测过氧化氢酶的方法,其特征在于,包括:
Ⅰ、取一系列不同浓度的过氧化氢酶标准样品与过氧化氢、辅助催化剂和氯金酸在满足选定液相环境中混合反应,并检测每一标准样品最终所形成的混合反应体系的颜色和/或可见光吸收强度,并依据标准样品浓度与混合反应体系颜色和/或可见光吸收浓度的对应关系建立标准图谱;
Ⅱ、取可能含有过氧化氢酶的测试样品与过氧化氢、辅助催化剂和氯金酸在满足选定液相环境中混合反应,并检测最终所形成的混合反应体系的颜色和/或可见光吸收强度,再与标准图谱比对,从而测得测试样品中所含过氧化氢酶的浓度。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的基于纳米金形成的可视化检测过氧化氢酶的方法,其特征在于,所述可见光的波长为540 nm。
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