[发明专利]一种铜离子可视化快速检测方法

权利要求书

1.一种铜离子可视化快速检测方法，其特征在于：将磷脂酰丝氨酸组装在纳米金表面，利用两个磷脂酰丝氨酸结合一个Cu²⁺离子的作用减小相邻的纳米金颗粒间距，使纳米金发生聚集产生颜色变化，从而达到对Cu²⁺离子浓度的可视化快速检测。

2.根据权利要求1所述的铜离子可视化快速检测方法，其特征在于：采用双层膜法把磷脂酰丝氨酸脂质体可控组装在纳米金表面，制备磷脂酰丝氨酸脂质体修饰的纳米金溶液。

3.根据权利要求2所述的铜离子可视化快速检测方法，其特征在于：所述的磷脂酰丝氨酸脂质体修饰的纳米金溶液的制备方法包括以下步骤：

（1）采用种子生长法合成溴化十六烷基三甲铵双层膜修饰的纳米金溶液

将1wt.% HAuCl₄稀释至2mM，取18.75μL 2mM HAuCl₄，加入66μL二次水，加入56.4μL 0.2M 溴化十六烷基三甲铵，加入9μL 0.1M NaBH₄，混匀放置2小时，即得晶种；取5mL 2mM HAuCl₄，加入35.5 mL 二次水，加入4mL 0.2M溴化十六烷基三甲铵，混匀；加入3mL 0.1M抗坏血酸，再加入2.5mL稀释40倍的晶种，混匀，25℃水浴24小时，即得溴化十六烷基三甲铵双层膜修饰的纳米金溶液50mL；

（2）采用双层膜法制备磷脂酰丝氨酸脂质体修饰的纳米金溶液

称取12wt.%的磷脂酰丝氨酸/1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂溶于氯仿，混匀，使总摩尔浓度为20mM，真空干燥后，加入与氯仿等体积的二次水，40℃恒温水浴1小时，之后通氮气10分钟；再用10W功率超声粉碎5分钟，此时脂质体分散液由浑浊变成澄清；最后12000rpm离心30分钟，取其上清，获得12 wt.% 磷脂酰丝氨酸/1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂脂质体分散液；

取1mL步骤（1）的溴化十六烷基三甲铵双层膜修饰的纳米金溶液，12000rpm离心30分钟，去上清，加1mL二次水，再12000rpm离心30分钟，去上清，加100μL二次水，加入2.5μL磷脂酰丝氨酸/1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂脂质体分散液，放入47℃恒温水浴5小时；然后8000rpm离心30分钟，去上清，加入400μL pH= 8.0的浓度为2 mM的2-吗啉乙磺酸/三羟甲基氨基甲烷缓冲液，混匀制成磷脂酰丝氨酸脂质体修饰的纳米金溶液。

4.根据权利要求2所述的铜离子可视化快速检测方法，其特征在于：测试时，取相同体积的水样和磷脂酰丝氨酸脂质体修饰的纳米金溶液混匀，40℃恒温10min后, 通过裸眼观测混合溶液颜色变化或紫外分光光度计测试溶液的吸光度对Cu²⁺进行半定量及定量快速检测。