[发明专利]蛋白A1G_01780在抗立氏立克次体的免疫保护中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛋白A1G_01780在抗立氏立克次体的免疫保护中的应用。

背景技术

立氏立克次体（Rickettsia rickettsii）是一种严格胞内寄生的革兰氏阴性菌，是落基山斑点热（Rocky Mountain Spotted Fever,RMSF）的病原体。该菌主要分布在北美洲，其为斑点热群立克次体(spotted fever group rickettsia,SFGR)中毒力最强的一个种，被列为生物战剂和潜在的生物恐怖剂。

落基山斑点热是一种严重威胁人类健康的人兽共患自然疫源性疾病。RMSF最早发现在美国西北部的爱达荷州和蒙大拿州，1899年Maxey报告了第一例RMSF临床病例。在1906到1909年之间，Ricketts首先对该病进行了病原学研究，他证实了安氏革蜱为该病的传播媒介。

RMSF的早期临床表现主要有发热，头痛和肌痛。后期病情严重者可出现血压下降，未接受治疗者可产生肺炎，组织坏死和循环衰竭，并发心和脑后遗症。在暴发型病例中可因心跳突然停止而死亡。虽然抗生素治疗对落基山斑点热有效，但由于立氏立克次体能以气溶胶的形式传播，一旦流行难以控制。并且RMSF早期症状缺乏特异性，很难与其他疾病相区别，难以做到早发现早治疗。因此采用有效的疫苗作为预防接种是防止RMSF发生和流行的最有效手段。

二十世纪中期到末期，RMSF疫苗的研制主要集中在灭活疫苗上。1970年美国陆军传染病医学研究所用鸡胚成纤维细胞培养立氏立克次体并通过蔗糖密度梯度离心获得纯化的病原体，将纯化立克次体甲醛灭活后制成疫苗，在1983年进行的人体保护性试验中证明该疫苗可以保护25%的接种者，可减轻患者的发热反应，并能使四环素的治疗效果更快更好。但是该灭活疫苗仅提供有限的保护作用，远没有达到有效疫苗保护标准。另外制备立氏立克次体灭活疫苗通常需要鸡胚或者细胞大量培养立克次体，但是提取纯化立克次体的防护要求高，工艺复杂，成本昂贵，因此难以大量制备和推广使用。

随着对RMSF疫苗研究的不断深入以及蛋白质组学的飞速发展，人们将目光转向了亚单位。研究发现立氏立克次体外膜蛋白A(OmpA)、外膜蛋白B(OmpB)以及普氏立克次体外膜蛋白B(OmpB)免疫产生的抗体可以中和立克次体对小鼠的致死毒性，给予OmpA及OmpB的单克隆抗体可以保护豚鼠有效抵抗致死剂量的立氏立克次体的感染并交叉保护小鼠抵抗致死剂量的康氏立克次体（R.conorii）的感染。这些外膜蛋白尽管有一定的保护作用，但是其免疫保护效果有限，目前难以代替灭活RMSF疫苗。因此，鉴定立氏立克次体的保护性抗原，研发更加安全、有效、持久的亚单位疫苗对预防RMSF具有重大的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种蛋白A1G_01780在抗立氏立克次体的免疫保护中的应用。

本发明提供的A1G_01780蛋白，为如下（1）-（3）任一所示的蛋白：

（1）SEQ ID No.1中自N端起第164位至第402位氨基酸所示的蛋白；

（2）SEQ ID No.1所示的蛋白；

（3）将（1）或（2）所示的序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质。

上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围。

上述基因中，所述编码基因为如下中至少一种：

1）SEQ ID No.3中自5’末端起第490位至第1206位核苷酸所示的DNA分子；

2)SEQ ID No.3所示的DNA分子；

3）在严格条件下与1）或2）限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；

4）与1）或2）或3）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码所述蛋白质的DNA分子。

含有上述任一所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也属于本发明的保护范围。

上述蛋白在制备预防和/或治疗立氏立克次体引起的疾病的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

上述应用中，所述疾病为落基山斑点热。

上述任一所述的应用中，所述产品为疫苗。

上述蛋白在制备降低被立氏立克次体感染的动物的脏器组织内立氏立克次体数量的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

上述应用中，所述脏器为脾脏、肝脏和/或肺脏。