[发明专利]一种可并行检测多种弧菌的基因芯片及其检测方法

权利要求书

1.一种可并行检测多种弧菌的基因芯片，包括有芯片载体，其特征在于，在芯片载体上固定有用于检测溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌和创伤弧菌的核苷酸探针；所述的用于检测溶藻弧菌的探针是从溶藻弧菌的hsp60基因和/或toxR基因中设计的；

所述的用于检测副溶血弧菌的探针是从溶藻弧菌的hsp60基因和/或toxR基因中设计的；

所述的用于检测哈维氏弧菌的探针是从溶藻弧菌的toxR基因中设计的；

所述的用于检测创伤弧菌的探针是从溶藻弧菌的hsp60基因中设计的。

2.如权利要求1所述的基因芯片，其特征在于所述的用于检测溶藻弧菌的核苷酸探针，其序列为SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2。

3.如权利要求1所述的基因芯片，其特征在于所述的用于检测副溶血弧菌的核苷酸探针，其序列为SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4。

4.如权利要求1所述的基因芯片，其特征在于所述的用于检测创伤弧菌的核苷酸探针，其序列为SEQ ID NO：5。

5.如权利要求1所述的基因芯片，其特征在于所述的用于检测哈维氏弧菌的核苷酸探针，其序列为SEQ ID NO：6。

6.权利要求1所述的基因芯片还固定有显示探针坐标位置的阳性质控探针，其核苷酸序列为SEQ ID NO：7；而与阳性质控探针杂交的阳性质控片段的核苷酸序列为SEQ ID NO：8 。

7.权利要求1所述的基因芯片的制备，包括如下步骤：

将核苷酸探针稀释至适当浓度后，在适当的温度、湿度条件下使用点制仪点制探针于固相醛基芯片上；然后将探针与芯片水合交联；洗脱去未连接的、连接不紧密的探针，封闭完成制备；

所述步骤核苷酸探针稀释至适当浓度，是使用缓冲液稀释至浓度为4-10 μ mol/L，与0.3M Na₂HPO₄溶液；按照1:1的比例混合后进行点制；

所述在适当的温度、湿度条件下使用点制仪点制探针于固相醛基芯片上：点样在室温20℃、湿度60%-70%的条件下进行。

8.权利要求1所述的基因芯片用于检测溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌中至少一种菌。