[发明专利]Lycojaponicumin C在治疗登革病毒感染药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，更具体涉及一种Lycojaponicumin C在制备治疗或预防登革病毒感染药物中的应用。 

背景技术

登革病毒（Dengue virus，DENV）能够引起登革热，其通过伊蚊传播，严重感染者出现登革出血热和登革休克综合症，病死率极高。该病毒有四个血清型，血清2型是流行病株。本病主要在东南亚，太平洋地区和美洲的热带和亚热带国家中流行。中国广东省，海南省，广西省曾经有14次不同规模的登革热流行。中国登革热的主要传播媒介是埃及伊蚊和白蚊伊蚊。前者分布于南方沿海地区，后者则在南北地区广泛存在南北地区。有报道显示已经从蚊子体内分离到登革病毒。但是，目前在临床上还没有有效的治疗药物。 

因此，我们应该高度重视对登革病毒的研究，加强对其的科研力度，做好相关知识和药物的储备，为我国在防控登革病毒感染的方面做出一定的贡献。 

本发明涉及的化合物Lycojaponicumin C是一个2012年发表（Wang,X.J.et al.,2012.Lycojaponicumins A-C,Three Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Lycopodium japonicum.Organic Letters14(10),2614-2617.）的新骨架化合物，该化合物拥有全新的骨架类型，对于本发明涉及的Lycojaponicumin C在制备治疗或预防登革病毒感染药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于登革病毒抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于登革病毒感染的防治显然具有显著的进步。 

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种Lycojaponicumin C在作为制备治疗或预防登革病毒感染药物中的应用，Lycojaponicumin C在10.0uM浓度下对DENV的抑郁率为93.19%。而Lycojaponicumin C在浓度为100uM条件下，Vero细胞的存活率为92.2%。Lycojaponicumin C能够有效地抑制登革病毒的增殖，但是对细胞毒性很小，可进一步开发为治疗登革病毒感染疾病的药物，具有广泛的应用前景。 

所述化合物Lycojaponicumin C结构如式（Ⅰ）所示： 

式（Ⅰ） 

本发明涉及的Lycojaponicumin C在制备治疗或预防登革病毒感染药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于登革病毒抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于登革病毒感染的防治显然具有显著的进步。 

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案： 

1、Lycojaponicumin C对Vero细胞的毒性实验： 

Vero细胞是DENV的易感细胞。因此，本实验首先检测Lycojaponicumin C对Vero细胞的细胞毒性，以不同浓度的Lycojaponicumin C作用于Vero细胞，来了解在细胞存活率为90%以上的Lycojaponicumin C的最大使用浓度，为后续的Lycojaponicumin C对DENV的抑制作用实验提供参考数据。 

2、Lycojaponicumin C对DENV的抑制实验： 

以不同浓度的Lycojaponicumin C作用于已经感染了DENV的Vero细胞，来获得Lycojaponicumin C对病毒的抑制效率。本实验中的Lycojaponicumin C的使用浓度均在使Vero细胞在90%以上存活率的浓度的范围内，因此，可以排除Lycojaponicumin C的浓度过高而对实验数据的分析产生影响。 

Lycojaponicumin C在治疗或预防登革病毒感染药物中的（抑制）应用，其基本过程是： 

A.Lycojaponicumin C对Vero细胞的毒性实验： 

Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）是DENV的易感细胞。实验中的Vero细胞购买于中国科 学院上海生科院细胞资料中心；MTT试剂盒购于碧云天生物技术研究所；胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）购买于美国GIBCO公司；细胞培养板购买于德国Greiner bioone公司；DMEM培养基和MEM培养基购买于美国GIBCO公司。 

实验步骤如下：