[发明专利]一种鸡传染性支气管炎活疫苗、耐热保护剂及其制备方法

权利要求书

1.一种耐热型鸡肾型传染性支气管炎活疫苗，该活疫苗由抗原和耐热保护剂组成，其特征在于所述抗原是指鸡肾型传染性支气管炎病毒K136株，保藏编号为CCTCC-V201320。

2.根据权利要求1所述的一种耐热型鸡肾型传染性支气管炎活疫苗，其特征在于所述抗原K136株病毒是由发明人针对我国目前流行的鸡肾型传染性支气管炎病毒连续鸡胚传代136代致弱获得的。

3.根据权利要求1或2所述的一种耐热型鸡肾型传染性支气管炎活疫苗，其特征在于所述抗原中包括的K136株病毒在传代致弱评价中，传至第80代病毒株受试鸡开始无死亡，第100代病毒株受试鸡开始无眼观病变，第120代病毒株开始受试鸡开始无组织学病变。

4.根据权利要求1或2或3所述的一种耐热型鸡肾型传染性支气管炎活疫苗，其特征在于所述抗原中包括的K136株病毒在免疫评价中，传至第136代病毒株免疫组分毒率为0/10，对照组分毒率为10/10。

5.根据权利要求1所述的一种耐热型鸡肾型传染性支气管炎活疫苗，其特征在于所述耐热保护剂包括：海藻糖10-12%，聚乙烯吡咯烷酮（PVP）1-2%，丙氨酸0.1%-0.5%，组氨酸0.2-0.5%，谷氨酸钠1-2%。

6.根据权利要求1所述的一种耐热型鸡肾型传染性支气管炎活疫苗的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）经鸡胚尿囊腔接种鸡传染性支气管炎弱毒K136株进行扩大培养；

2）收获扩大培养病毒液，经效价测定、无菌处理制备成疫苗抗原；

3）将疫苗抗原与耐热保护剂按比例混合均匀后冷冻干燥制备成疫苗。

7.根据权利要求1或5所述的一种耐热型鸡肾型传染性支气管炎活疫苗耐热保护剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将海藻糖，丙氨酸，组氨酸，谷氨酸钠，溶解于1/2总量的去离子水中，充分溶解后用0.22μm的滤膜进行过滤除菌；

2）聚乙烯吡咯烷酮（PVP）充分溶解于1/2总量的去离子水中，116℃高压30min除菌，

3）两者充分混匀后即得耐热保护剂。