[发明专利]一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗及制备方法

权利要求书

1.一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗，该活疫苗由抗原和冻干保护剂组成，其特征在于所述抗原包括鸡肾型传染性支气管炎病毒、鸡呼吸型传染性支气管炎病毒以及鸡新城疫病毒。

2.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗，其特征在于所述抗原中包括的鸡肾型传染性支气管炎病毒是指保藏编号为CCTCC-V201320的K136株；所述抗原中包括的鸡呼吸型传染性支气管炎病毒是指H120株；所述抗原中包括的鸡新城疫病毒是指La Sota株。

3.根据权利要求1或2所述的一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗，其特征在于所述抗原中包括的K136株病毒是由发明人针对我国目前流行的鸡肾型传染性支气管炎病毒连续鸡胚传代136代致弱获得的。

4.根据权利要求1或2或3所述的一种鸡传染性支气管炎二价活疫苗，其特征在于所述抗原中包括的K136株病毒在传代致弱评价中，传至第80代病毒株受试鸡开始无死亡，第100代病毒株受试鸡开始无眼观病变，第120代病毒株受试鸡开始无组织学病变。

5.根据权利要求1或2或3所述的一种鸡传染性支气管炎二价活疫苗，其特征在于所述抗原中包括的K136株病毒在免疫评价中，传至第136代病毒株免疫组分毒率为0/10，对照组分毒率为10/10。

6.一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗的制备方法，其特征是在于将鸡新城疫La Sota株和传染性支气管炎K136株或传染性支气管炎H120株同胚接种鸡胚扩大培养后，与单独接种鸡胚扩大培养的传染性支气管炎H12O株或传染性支气管炎K136株按比例混合制备成抗原，再将抗原与冻干保护剂按比例混合进行冷冻干燥后制备成疫苗。

7.根据权利要求6所述的一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将NDV-La Sota株和IBV-K136或IBV-H120积混合经尿囊腔接种鸡胚，进行病毒扩大培养；

2）将IBV-H120株或IBV-K136株经尿囊腔单独接种鸡胚，进行病毒扩大培养；

3）分别收获上述两种病毒扩大培养液，经无菌处理并进行病毒含量测定后，等体积混合均匀制备成本发明疫苗的抗原；

4）将疫苗抗原与冻干保护剂等体积混合均匀后冻干，制备成本发明中的疫苗。

8.根据权利要求6或7所述的一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗的制备方法，其特征在于在制备抗原的过程中，优选将鸡新城疫La Sota株和传染性支气管炎K136株同胚接种鸡胚培养，将传染性支气管炎H120株单独接种鸡胚扩大培养。

9.根据权利要求6或7所述的一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗的制备方法，其特征在于在抗原制备过程中两种病毒的扩大培养液是等体积混合的。

10.根据权利要求6或7所述的一种鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗的制备方法，其特征在于在疫苗制备过程中抗原和冻干保护剂是等体积混合的。