[发明专利]一种同时分析人基因组DNA 26个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒及其使用方法和应用

权利要求书

1.一种同时分析人基因组DNA26个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，所述的26个基因座为：D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、D1S1656、Penta E、D2S441、TPOX、TH01、D2S1338、CSF1PO、Penta D、D10S1248、D22S1045、D19S433、vWA、D21S11、D18S51、D6S1043、D8S1179、D5S818、D12S391、FGA、DYS391、Y indel及性别基因座Amelogenin；其特征在于：该试剂盒包括26个基因座对应的引物如下：

2.根据权利要求1所述的一种同时分析人基因组DNA26个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于：26个基因座对应的引物的浓度为：

3.根据权利要求1或2所述的一种同时分析人基因组DNA26个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于所述的每个基因座对应的引物中至少有一个引物的5’端进行荧光染料标记。

4.根据权利要求3所述的一种同时分析人基因组DNA26个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于所述的荧光染料标记物为蓝色荧光染料6-FAM、绿色荧光染料HEX、黄色荧光染料TAMRA和红色荧光染料标记ROX，内标选用橙色荧光SIZ。

5.根据权利要求4所述的一种同时分析人基因组DNA26个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于将所述26个基因座分组，具体为：D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、D1S1656和Penta E为第一组，该组基因座对应的引物的荧光标记物为6-FAM、HEX、TEMRA和ROX的任意一种；D2S441、TPOX、TH01、D2S1338、CSF1PO、Penta D和D10S1248为第二组，该组基因座对应的引物的荧光标记物为与第一组不同的荧光染料标记物；D22S1045、D19S433、vWA、D21S11、D18S51、D6S1043和Y indel为第三组，该组基因座对应的引物的荧光标记物为与第一组和第二组都不同的荧光染料标记物；DYS391、D8S1179、D5S818、D12S391、FGA，以及性别基因座Amelogenin为第四组，该组基因座对应的引物的荧光标记物为与第一组、第二组和第三组都不同的荧光染料标记物；内标选用橙色荧光标记，荧光标记物为SIZ。

6.根据权利要求1-5任意一种所述的一种同时分析人基因组DNA26个基因座的荧光标记复合扩增的试剂盒，其特征在于所述的试剂盒由如下组成：

组分体积Reaction Mix10.0μL基因组DNA0.125-5ng权利要求2所述的引物5.0μL热启动Taq酶（5U/μL）0.5μLsdH₂O补足至25.0μL

其中所述的Reaction Mix含有MgCl₂7.5mM,Tris-HCl buffer125mM,KCl125mM,dNTPs7.5m M,BSA2mg/ml。