[发明专利]一种鱼源抗冻多肽及其制备方法

权利要求书

1.一种抗冻多肽，其特征在于：所述多肽的氨基酸序列为：Lys-Gly-Glu-Ala-Gly-Asp-Asn-Gly-Ala-Lys-Gly-Asp-Ala-Gly-Ser-Pro-Gly。

2.一种如权利要求1所述的抗冻多肽的制备方法，其特征在于：以鱼皮、鱼鳞的鱼源胶原蛋白为原料，对其进行酶解，将酶解产物进行分离纯化得到所述抗冻多肽。

3.一种如权利要求2所述的抗冻多肽的制备方法，其特征在于：所述酶解条件为：木瓜蛋白酶：鱼源胶原蛋白=1:10-15（w/w），pH为7.0、温度是35℃-40℃、酶解时间为20-40分钟。

4.一种如权利要求3所述的抗冻多肽的制备方法，其特征在于：所述酶解条件为：木瓜蛋白酶：鱼源胶原蛋白=1:10（w/w），pH为7.0、温度是37℃、酶解时间为30分钟。

5.一种如权利要求2所述的抗冻多肽的制备方法，其特征在于：所述分离纯化的步骤为：所述分离纯化的具体步骤为：酶解产物首先利用Sephadex G-50凝胶色谱进行分离，洗脱液为去离子水，流速为2mL/min，洗脱峰在225nm下进行测量；收集具有最佳抗冻活性的峰，再用Sulfopropyl-Sepadex C-25阳离子交换色谱进行分离，洗脱液为NaCl浓度梯度为0-0.5 M的0.01mol/L pH7.0的磷酸缓冲液，流速为0.5mL/min；收集具有最佳抗冻活性的峰，利用RP-HPLC反相高效液相色谱再进行进一步的分离，反相HPLC的分离条件是用10%-90% （v/v）乙腈溶液作为洗脱液梯度洗脱，流速为1mL/min，收集25%乙腈和75 %水（v/v）处的洗脱峰,得到所述的抗冻多肽。