[发明专利]一种快速获取大量优质神经干细胞的培养方法

说明书

本发明提供一种提高干细胞培养效率的方法，所述方法包括在亚磁环境下培养干细胞。本发明使用的方法在不影响细胞性质的前提下快速获得大量优质的干细胞，不会对细胞造成任何额外生物或化学污染，对解决干细胞治疗中细胞数量稀少问题及提高干细胞相关产品产量有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种能提高神经干细胞培养效率且不影响干细胞品质的培养方法。

背景技术

当前对于神经干细胞的分离培养，主要是利用添加生长因子EGF和bFGF无血清培养基来维持细胞增殖，形成神经干细胞球，从而把干细胞从细胞混合物中分离并维持细胞的正常生长[1-6]。但是，受细胞培养条件限制及组织来源等因素的限制，常规方法最终能够获得的细胞数量十分有限。此外，大部分神经干细胞在体外传代20代后都会出现退化，并且神经干细胞对培养环境要求比较严格，容易出现因环境变化导致的细胞品质改变等问题，所有这些因素都导致了神经干细胞的基础研究、临床应用以及工业化生产受到限制[2，5-6]。目前，已有研究发现一些化学分子或生物分子能促进神经干细胞的增殖，从而在短时间内获取大量细胞，但是，化学分子或生物分子除了对细胞增殖的效应，往往对干细胞的其他方面产生额外的效应，即它们在影响细胞增殖的同时也会可能会导致细胞自身品质的改变，所以存在风险[7-10]。另外一个不可避免的问题是化学分子或生物分子的使用为后续的科学研究或临床及工业应用埋下隐患，难以祛除。

亚磁环境是一种物理环境，是利用设备把环境中磁场屏蔽之后产生的一种磁场强度极低的环境。过去的研究中，科学界一直没有对亚磁环境的标准给出一个明确的定义，近期中国科学院生物物理所赫荣乔研究组发表的文章把亚地磁场定义为磁场总强度小于500nT的磁场环境[11]。经过过去几十年的研究，科学家发现亚磁场对动物的生长、发育、行为，植物的生长、发育，微生物增殖、抗药性，细胞的增殖、形态等生物学过程产生不同的效应[12-19]。这些结果说明亚磁拥有十分广泛的生物学效应，因此，亚磁相关研究引起了广泛的关注。

发明内容

本发明的发明人发现在亚地磁场环境中生长的神经干细胞增殖速度显著增加，但细胞增殖能力和分化能力没有发生显著改变。由于细胞在培养过程中不引入额外化学分子或生物分子的干扰，并且在短时间内能得到与常规方法相比数倍的优质细胞，所以，这种方法极大的降低成本，提高效率。

更具体地，本发明提供以下各项：

1.一种提高干细胞培养效率的方法，所述方法包括在亚磁环境下培养干细胞。

2.根据1所述的方法，其中所述亚磁环境是通过屏蔽环境磁场产生的。

3.根据1所述的方法，其中所述亚磁环境的磁场总强度小于500nT。

4.根据1所述的方法，其中所述干细胞来自于哺乳动物，所述哺乳动物选自人、狗、猫、马、牛、兔、猴、大鼠、小鼠。

5.根据4所述的方法，其中所述干细胞来自于人。

6.根据1所述的方法，其中所述干细胞是神经干细胞。

7.根据6所述的方法，其中所述神经干细胞包括原代培养脑来源神经干细胞、纯化的神经干细胞、大鼠SVZ来源神经干细胞。

8.利用根据1-7中任一项所述的方法培养获得的神经干细胞。

附图说明

图1：亚磁环境(hypogeomagnetic field，HGMF)磁场强度分布示意图，虚线标出为放置细胞的位置。

图2：地磁场(geomagnetic field，GMF)环境磁场强度分布示意图，虚线标出为放置细胞的位置。

图3：在地磁(GMF)或亚磁(HGMF)环境中生长的神经干细胞形成的神经球。